利索能及
我要发布
收藏
专利号: 2019103834968
申请人: 沧州职业技术学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-12-08
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种观察外植体发生途径的方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)材料的获得:摘取燕子掌新鲜的健康叶片和茎段,在自来水下冲洗表面20min;

(2)无菌处理:将冲洗完成后的叶片和茎段在超净工作台上用75%的酒精浸泡15s,浸泡完成后用无菌水冲洗1次,然后浸泡于0.1%的升汞溶液中消毒6min,消毒完成后再用无菌水冲洗3-5次,最后用消毒滤纸吸干叶片和茎段表面的水分;

(3)无菌短枝型:将步骤(2)获得的茎段切成具有一对腋芽的小茎段接种至MS基本培养基上,诱导茎段生长;

(4)丛生芽增殖型:将步骤(2)获得的茎段切成具有一对腋芽的小茎段接种至丛生芽增殖培养基上,诱导产生丛生芽;

(5)胚状体发生型:将步骤(2)获得的叶片切成约1.0cm*1.0cm的大小接种至MS基本培养基上,诱导产生不定芽;

(6)器官发生型Ⅰ:将步骤(2)获得的叶片切成约1.0cm*1.0cm的大小接种至愈伤组织诱导培养基上,诱导产生愈伤组织;

(7)器官发生型Ⅱ:,将步骤(6)获得的愈伤组织切成0.5cm*0.5cm的大小接种至MS基本培养基上,诱导愈伤组织再分化形成小苗。

2.如权利要求1所述的一种观察外植体发生途径的方法,其特征在于:所述步骤(2)中的无菌操作台在使用之前需开启紫外线杀菌灯和风机进行杀菌30min。

3.如权利要求1所述的一种观察外植体发生途径的方法,其特征在于:所述步骤(2)中的0.1%的升汞溶液中包含1-2滴20mg/L的吐温。

4.如权利要求1所述的一种观察外植体发生途径的方法,其特征在于:所述步骤(3)中的无菌短枝型发生途径的培养基为MS+蔗糖20g/L+琼脂6g/L,PH为5.8-6.0。

5.如权利要求1所述的一种观察外植体发生途径的方法,其特征在于:所述步骤(4)中的丛生芽增殖培养基是由MS MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6g/L,PH为

5.8-6.0。

6.如权利要求1所述的一种观察外植体发生途径的方法,其特征在于:所述步骤(5)中的胚状体发生途径的培养基为MS+蔗糖20g/L+琼脂6g/L,PH为5.8-6.0。

7.如权利要求1所述的一种观察外植体发生途径的方法,其特征在于:所述步骤(6)的培养基是由MS+6-BA2mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6g/L,PH为5.8-6.0。

8.如权利要求1所述的一种观察外植体发生途径的方法,其特征在于:所述步骤(7)的培养基是由MS+蔗糖20g/L+琼脂6g/L,PH为5.8-6.0。

9.如权利要求1所述的一种观察外植体发生途径的方法,其特征在于:所述步骤(3)至所述步骤(7)的培养条件为温度24-26℃,光照强度2000-3000lux,光照时间10-12h/d。