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专利号: 2019102393027
申请人: 江苏医药职业学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-05-14
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种siRNA在制备抑制乳腺癌细胞T-47D生长和/或增殖的药物中的应用,其特征在于,所述siRNA特异性地降低NKIRAS2基因表达;

所述siRNA为由以下三组核苷酸序列所示的核酸分子组成的组合:

(1)第一组核苷酸序列

所述第一组核苷酸序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示,所述SEQ ID NO:1为5'-CCUUGGCAACAAGUGUGACUU-3',所述SEQ ID NO:2为5'-AAGUCACACUUGUUGCCAAGG-3';

(2)第二组核苷酸序列

所述第二组核苷酸序列如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示,所述SEQ ID NO:3为5'-CAGCUUCUGUAUGGGAACCAU-3',所述SEQ ID NO:4为5'-AUGGUUCCCAUACAGAAGCUG-3';

(3)第三组核苷酸序列

所述第三组核苷酸序列如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示,所述SEQ ID NO:5为5'-UUCGGAGAUGAUCGAGACGCA-3',所述SEQ ID NO:6为5'-UGCGUCUCGAUCAUCUCCGAA-3'。

2.一种shRNA在制备抑制乳腺癌细胞T-47D生长和/或增殖的药物中的应用,其特征在于,所述shRNA为由以下三组核苷酸序列所示的核酸分子组成的组合:(1)第五组核苷酸序列

所述第五组核苷酸序列如SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10所示,所述SEQ ID NO:9为5'-CCGGCCUUGGCAACAAGUGUGACUUCUCGAGAAGUCACACUUGUUGCCAAGGUUUUUG-3',所述SEQ ID NO:

10为5'-AAUUCAAAAACCUUGGCAACAAGUGUGACUUCUCGAGAAGUCACACUUGUUGCCAAGG-3';

(2)第六组核苷酸序列

所述第六组核苷酸序列如SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12所示,所述SEQ ID NO:11为

5'-CCGGCAGCUUCUGUAUGGGAACCAUCUCGAGAUGGUUCCCAUACAGAAGCUGUUUUUG-3',所述SEQ ID NO:12为5'-AAUUCAAAAACAGCUUCUGUAUGGGAACCAUCUCGAGAUGGUUCCCAUACAGAAGCUG-3';

(3)第七组核苷酸序列

所述第七组核苷酸序列如SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14所示,所述SEQ ID NO:13为

5'-CCGGUUCGGAGAUGAUCGAGACGCACUCGAGUGCGUCUCGAUCAUCUCCGAAUUUUUG-3',所述SEQ ID NO:14为5'-AAUUCAAAAAUUCGGAGAUGAUCGAGACGCACUCGAGUGCGUCUCGAUCAUCUCCGAA-3'。

3.编码权利要求2所述的shRNA的DNA在制备抑制乳腺癌细胞T-47D生长和/或增殖的药物中的应用,其特征在于,所述DNA为由以下三组核苷酸序列所示的核酸分子组成的组合:(1)第九组核苷酸序列

所述第九组核苷酸序列如SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18所示,所述SEQ ID NO:17为

5'-CCGGCCTTGGCAACAAGTGTGACTTCTCGAGAAGTCACACTTGTTGCCAAGGTTTTTG-3',所述SEQ ID NO:18为5'-AATTCAAAAACCTTGGCAACAAGTGTGACTTCTCGAGAAGTCACACTTGTTGCCAAGG-3';

(2)第十组核苷酸序列

所述第十组核苷酸序列如SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:20所示,所述SEQ ID NO:19为

5'-CCGGCAGCTTCTGTATGGGAACCATCTCGAGATGGTTCCCATACAGAAGCTGTTTTTG-3',所述SEQ ID NO:20为5'-AATTCAAAAACAGCTTCTGTATGGGAACCATCTCGAGATGGTTCCCATACAGAAGCTG-3';

(3)第十一组核苷酸序列

所述第十一组核苷酸序列如SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:22所示,所述SEQ ID NO:21为

5'-CCGGTTCGGAGATGATCGAGACGCACTCGAGTGCGTCTCGATCATCTCCGAATTTTTG-3',所述SEQ ID NO:22为5'-AATTCAAAAATTCGGAGATGATCGAGACGCACTCGAGTGCGTCTCGATCATCTCCGAA-3'。

4.一种重组载体,其特征在于,所述重组载体为在GV493质粒的多克隆位点AgeI和EcoRI插入如编码权利要求3所述的编码shRNA的DNA得到的重组载体。

5.一种重组慢病毒,其特征在于,所述重组慢病毒由权利要求4所述的重组载体与病毒包装辅助质粒pHelper 1.0载体和病毒包装辅助质粒pHelper 2.0载体共转染哺乳动物细胞得到。

6.一种宿主细胞,其特征在于,包括权利要求1所述的siRNA、权利要求2所述的shRNA、权利要求3所述的编码shRNA的DNA、权利要求4所述的重组载体和权利要求5所述的重组慢病毒中的至少一种。