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专利号: 2019102311188
申请人: 江西省科学院微生物研究所
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-09-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种能拆分(+/-)γ-内酰胺得到(+)γ-内酰胺的菠萝泛菌,其特征在于:所述菠萝泛菌为菠萝泛菌(Pantoea ananatis)Y22,于2018年12月5日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为:CCTCC NO:M 2018862。

2.如权利要求1所述的能拆分(+/-)γ-内酰胺得到(+)γ-内酰胺的菠萝泛菌,其特征在于:所述菠萝泛菌能抑制金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、痢疾杆菌和粪肠杆菌。

3.一种如权利要求1或2所述的能拆分(+/-)γ-内酰胺得到(+)γ-内酰胺的菠萝泛菌的应用,其特征在于,采用所述菠萝泛菌,在水相体系中,以(+/-)γ-内酰胺为底物,进行不对称水解拆分制备得到所述(+)γ-内酰胺。

4.如权利要求3所述的能拆分(+/-)γ-内酰胺得到(+)γ-内酰胺的菠萝泛菌的应用,其特征在于,所述以(+/-)γ-内酰胺为底物,进行不对称水解拆分制备得到所述(+)γ-内酰胺的具体步骤如下:(1)取微生物菌株:为所述菠萝泛菌Y22;

(2)先将步骤(1)中所述菠萝泛菌Y22进行离心获得湿菌体备用;

(3)拆分体系的配制:用磷酸盐缓冲液配制2g/L~600g/L的(+/-)γ-内酰胺;

(4)拆分(+/-)γ-内酰胺得到(+)γ-内酰胺:将步骤(3)的配制好的(+/-)γ-内酰胺加入到在步骤(2)的湿菌体中进行反应。

(5)拆分液的处理和分析:将步骤(4)中所得微生物拆分反应之后的液体,离心除去菌体,取上清液采用乙酸乙酯萃取,萃取液稀释后进行手性HPLC检测;

(6)产物的分离提取:采用二氯甲烷萃取步骤(5)中所得菌体,并依次经过干燥、蒸发浓缩、冷却结晶,最后得到所述的(+)γ-内酰胺。

5.如权利要求4中所述的能拆分(+/-)γ-内酰胺得到(+)γ-内酰胺的菠萝泛菌的应用,其特征在于,所述步骤(3)中磷酸盐缓冲液的pH为4~10,浓度为0.01~0.5mol/L。

6.如权利要求4中所述的能拆分(+/-)γ-内酰胺得到(+)γ-内酰胺的菠萝泛菌的应用,其特征在于,所述步骤(4)中菌体终浓度为0.5~100g/L湿菌体,反应温度为20~60℃,反应时间为1~24h,摇床转速为100~300rpm。

7.如权利要求4中所述的能拆分(+/-)γ-内酰胺得到(+)γ-内酰胺的菠萝泛菌的应用,其特征在于,所述步骤(5)中在20~80℃下蒸发浓缩、1~4℃下冷却结晶。

8.如权利要求4中所述的能拆分(+/-)γ-内酰胺得到(+)γ-内酰胺的菠萝泛菌的应用,其特征在于,所述步骤(6)中所述(+)γ-内酰胺的光学纯度(Ee值)为95.0%~100%,化学纯度为95%~99%。

9.一种如权利要求1或2所述的菠萝泛菌在生产(+)γ-内酰胺酶中的应用。