1.同时敲低烟草MLO2、MLO6和MLO12基因的多顺反子tRNA-sgRNA在制备抗白粉菌烟草品种中的应用,其特征在于:所述MLO2的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示,所述MLO6的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示,所述MLO12的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示;所述同时编辑MLO2, MLO6和MLO12基因的多顺反子tRNA-sgRNA的靶序列如SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12所示。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述同时编辑MLO2, MLO6和MLO12基因的多顺反子tRNA-sgRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示。
3.一种同时敲低烟草MLO2、MLO6和MLO12基因的多顺反子tRNA-sgRNA,其特征在于:所述多顺反子tRNA-sgRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示。
4.含有权利要求3所述多顺反子tRNA-sgRNA的编辑失活载体,其特征在于:所述编辑失活载体由多顺反子tRNA-sgRNA连入pORE-Cas9载体Bsa I酶切位点处而得。
5.权利要求3所述多顺反子tRNA-sgRNA或权利要求4所述编辑失活载体在制备抗白粉菌烟草品种中的应用。
6.一种制备抗白粉病烟草品种的方法,其特征在于:构建同时敲除MLO2, MLO6和MLO12基因的多顺反子tRNA-sgRNA,然后连入pORE-Cas9载体Bsa I酶切位点处获得编辑失活载体,转化烟草,筛选抗性芽,生根培养,获得T0代转基因植株,自交获得T1代转基因种子,将T1代转基因种子播种在卡那霉素抗性MS培养基中,获得T1代转基因植株,筛选基因敲除突变植株,即得抗白粉病烟草品种;所述同时编辑MLO2, MLO6和MLO12基因的多顺反子tRNA-sgRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示。