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专利号: 2019100726355
申请人: 徐州生物工程职业技术学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-04-09
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种虫草参的组织培养方法,其特征在于:包括如下步骤:

(1)外植体的选择及预处理:选用虫草参健壮植株的幼嫩茎段作外植体,将叶片剪去后清洗除去表面污垢,再用流水冲洗30 min-1h后转移至超净工作台上备用;

(2)外植体表面消毒与诱导:将虫草参茎段用75%的乙醇处理10-20 s,再用0.1%氯化汞处理4-6 min,用无菌水冲洗5-7次,将茎段剪成1-2 cm的单芽茎段,接种于诱导培养基中;

(3)培养条件:将接种好的单芽茎段置于光照培养架上进行培养,控制温度为23-27℃,湿度为75%-85%,光照强度为2000-3000 lx,每日光照14 h;

(4)不定芽的分化与增殖:步骤(2)中的单芽茎段在步骤(3)的培养条件下,7-10天观察到不定芽的分化,待新生芽长到3-4cm时,将新生的不定芽剪下,转接至增殖培养基上继代;

(5)壮苗培养:待新生丛芽长至3-4 cm高后,将其切下,接种至壮苗培养基中;

(6)生根培养:选取高3-4 cm,带2-3轮真叶的芽,接种至生根培养基上进行培养;

(7) 炼苗移栽:待组培苗生根后进行炼苗,在温度为20-25°C、光照强度2000 lx,每日光照12 h的条件下,将培养瓶盖打开炼苗 3天;将炼苗后的组培苗小心去除根部培养基,并用质量分数为0. 125%多菌灵溶液清洗根部,种植于育苗钵内。

2.如权利要求1所述的一种虫草参的组织培养方法,其特征在于:上诉步骤(1)中外植体的采集在持续三天以上的晴朗天气进行。

3.如权利要求1所述的一种虫草参的组织培养方法,其特征在于:上诉步骤(1)中采用洗衣粉水振荡的方法将外植体表面污垢清洗除去。

4.如权利要求1所述的一种虫草参的组织培养方法,其特征在于:上诉步骤(2)中的诱导培养基和步骤(4)中增殖培养基的成分包括MS基本培养基、6-BA、NAA、活性炭,同时添加蔗糖30g/L、琼脂7g/L,pH为5.8。

5.如权利要求4所述的一种虫草参的组织培养方法,其特征在于: 6-BA的浓度为 0.5 mg/L、1.0mg/L或2.0mg/L中的一种,NAA的浓度为0.1 mg/L、0.2 mg/L或0.5 mg/L中的一种,活性炭的浓度为0或1.5 g/L。

6.如权利要求1所述的一种虫草参的组织培养方法,其特征在于:步骤(5)壮苗培养基包括MS基本培养基、活性炭、NAA、蔗糖,琼脂7g/L,pH为5.8。

7.如权利要求6所述的一种虫草参的组织培养方法,其特征在于:活性炭浓度为0、1.5 g/L或3.0 g/L中的一种,NAA的浓度为0.1 mg/L、0.2 mg/L或0.5 mg/L中的一种,蔗糖浓度为20 g/L、30 g/L或40 g/L中的一种。

8.如权利要求1所述的一种虫草参的组织培养方法,其特征在于:步骤(6)生根培养基以MS或1/2MS作为基本培养基,附加浓度为0.1 mg/L、0.2 mg/L或0.5 mg/L的NAA,蔗糖30 g/L,琼脂7 g/L,pH为5.8。

9.如权利要求1所述的一种虫草参的组织培养方法,其特征在于:步骤(7)中的育苗基质包括草炭、蛭石和珍珠岩,草炭、蛭石和珍珠岩以体积比2:1:1进行混合,放置于温室大棚内,控制温度为20-25°C,在自然光照下生长不低于10 天。