1.一种大果酸浆的特异性核苷酸序列,其特征在于该核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,具体为:
CAACAATGGCTACCACGGAATCGTCTTGACGCGTAGTATTGTATTTTGATAGTGTTGGAGCGTTTGGAGCTTGCTCGTGTCGGTTTGAGCTATGGGAGCCCGTTTGGCTTCGTTTCTGCGGTTCTGCATTGAGGTAGGCTTTGTCTTCCTTTTTGGTTCAGACTGTACTGTTGTAGGACTGACACAGCACGGCTGGTCGTGTGGGAGGAGTTTATAGGTTGGATACCTGCTTTGTTATTATTATTACCTTCTCGTGTCACATGGGGCCCGGTAAGGGCATAGTTGGGCGGTTGAGCCGCGTGGGTCCCCGTAGGCCGTGCTTTGGCCGATGGACCATCTTTTGCTATAGCTTAGCCTTATTTCAGCTATCCTGTAGAGGTTAGATAATGTAGACTTGTTTAGGCTCCCATTGATCCTTCTGGCCTAGGTGGGGCTTACGGTGGTTGGGTTTTGTTGTGCTGACGTTGGAGGTGAGCTCCTGAAGCCCTCGTTACCCTATTAGGTGCTCTGGTTGTAGCTGCTAGCTCCCGTTTGAGCCGGATCTGGTGAGGCTTTGCCTCCCGAGTGACGGGCGGGTCACGATCCGTGGTGCTTTAGTGTTACCTGGACCTTTTTACGGGGTGGCCTACTTGGCCTCCTGGGGTCCCGCACACCGGCTGCAGTAGCCGTGGACGATATCTTTGACCTTACGAGCCGACTTTGTTGTTGGGGTCCCGATTCTGAGATGGATCTTGTTACGATGATGGCATGGTTTGGGTACTTCAGCTTATTTCTTTTGATGGATACGTTGGACTGGTTCTTTCCCGTGGTA。
2.基于如权利要求1所述的一种大果酸浆的特异性核苷酸序列,开发获得一种大果酸浆的特异性标记引物,其特征在于:包括如SEQ ID NO.2所示的上游引物SPM01F和如SEQ ID NO.3所示的下游引物SPM01R,具体序列如下:上游引物SPM01F:5’-CGTTTGGCTTCGTTTCTGC-3’;
下游引物SPM01R:5’-TATCGTCCACGGCTACTGC-3’。
3.利用如权利要求2所述的一种大果酸浆的特异性标记引物鉴别大果酸浆的方法,其特征在于:
步骤一、提取被测植物样品的基因组总DNA;
步骤二、以步骤一提取的样品基因组总DNA为模板,以上游引物SPM01F和下游引物SPM01R作为扩增引物,进行PCR扩增,获得PCR产物;
步骤三、利用1.5﹪琼脂糖凝胶对步骤二所获得的PCR产物进行电泳检测,若电泳结果出现分子量为577bp大小的DNA条带,则被测样品为大果酸浆,反之则不是。
4.如权利要求3所述的鉴别大果酸浆的方法,其特征在于:步骤二中,所述的PCR扩增体系(总体积为20μL)为:2μL的10×Buffer(含MgCl2),0.8μL的dNTPs(10mM),1μL的上游引物SPM01F(10μM),1μL的下游引物SPM01R(10μM),1μL的模板DNA(50ng/μL),0.5μL的Taq酶(2U/μL),13.7μL ddH2O。
5.如权利要求3所述的对大果酸浆进行鉴别的方法,其特征在于,步骤二中,所述的PCR扩增程序为:94℃预变性5min;32个循环(94℃变性45s,58℃退火45s,72℃延伸1.5min);72℃延伸10min。