1.一种二维过渡金属碳化物-核酸适配体探针,其特征是:该探针包括纳米片Ti3C2 MXenes、氨基酸和修饰有羧基的CD63蛋白核酸适配体,所述纳米片Ti3C2 MXenes通过Ti-N键与氨基酸相连,氨基酸通过酰胺键与核酸适配体相连。
2.如权利要求1所述的二维过渡金属碳化物-核酸适配体探针,其特征是:所述核酸适配体的序列为:5'-COOH-TTTTTTCAC CCC ACC TCG CTC CCG TGA CAC TAA TGC TA。
3.权利要求1或2所述的二维过渡金属碳化物-核酸适配体探针的制备方法,其特征是,该方法包括以下步骤:将纳米片Ti3C2 MXenes和氨基酸置于水中混合均匀后,搅拌,分离得到沉淀物,将得到的沉淀物与适配体进行酰胺反应即可得到二维过渡金属碳化物-核酸适配体探针;
进一步的,所述氨基酸为甘氨酸或亮氨酸;
进一步的,所述Ti3C2 MXenes、氨基酸和水的投料比例为(0.5~1)mg:(4~6)mg:(10~
40)mL;室温下搅拌18~36h;
进一步的,所述酰胺反应的温度为35~40℃,时间为0.5~1.5h。
4.一种与权利要求1或2所述的探针配合使用的生物传感器电极,其特征是,包括:表面修饰有聚丙烯酰胺的基体电极、海藻酸钠和修饰有氨基的CD63蛋白核酸适配体;
所述表面修饰有聚丙烯酰胺的基体电极和修饰有氨基的CD63蛋白核酸适配体均通过羧氨反应与海藻酸钠的连接;
进一步的,所述基体电极为玻碳电极;
进一步的,所述核酸适配体的序列为:5'-NH2-TTTTTTCAC CCC ACC TCG CTC CCG TGA CAC TAA TGC TA。
5.权利要求4所述的生物传感器电极的制备方法,其特征是,该方法包括:将聚丙烯酰胺溶液滴到基体电极上,孵化待干;然后将基体电极浸泡在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)、N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和海藻酸钠的混合溶液中进行孵化;随后将基体电极进入核酸适配体溶液中进行孵化,得到生物传感器电极。
6.如权利要求5所述的制备方法,其特征是:所述1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)、N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和海藻酸钠的体积比例为0.8~1.2:0.8~1.2:
1.8~2.2,EDC的浓度为80~120μM,NHS的浓度为300~500μM,海藻酸钠的浓度为0.5~
1.5mg/ml;在35~40℃孵化1~3h;
进一步的,随后将基体电极进入核酸适配体溶液中进行孵化,孵化条件为:35~40℃孵化1~3h。
7.一种电致化学发光(ECL)生物传感器,其特征是:该生物传感器包括权利要求1或2所述的二维过渡金属碳化物-核酸适配体探针和权利要求4所述的生物传感器电极,当外泌体存在时,所述二维过渡金属碳化物-核酸适配体探针、所述生物传感器电极和外泌体形成三明治结构,并将该三明治结构浸泡在氯金酸溶液中,原位形成AuNPs-二维过渡金属碳化物-核酸适配体探针-外泌体-生物传感器电极,即为电致化学发光(ECL)生物传感器。
8.一种电致化学发光的试剂盒,其特征是:该试剂盒至少包括权利要求1或2所述的二维过渡金属碳化物-核酸适配体探针、权利要求4所述的生物传感器电极、氯金酸溶液和鲁米诺。
9.权利要求1或2所述的二维过渡金属碳化物-核酸适配体探针、权利要求4所述的生物传感器电极或权利要求7所述的电致化学发光(ECL)生物传感器或权利要求8所述的试剂盒在采用电致化学发光方法检测外泌体中的应用。
10.一种非诊断目的的检测外泌体的方法,其特征是,该方法包括:
将权利要求4所述的生物传感器电极浸泡至待测外泌体溶液中,使外泌体附着在生物传感器电极上,随后将附着外泌体的生物传感器电极浸泡至权利要求1或2所述的二维过渡金属碳化物-核酸适配体探针溶液中,使探针附着在生物传感器电极的外泌体上,从而组成探针和生物传感器电极夹载外泌体的生物传感器,再将所述生物传感器浸泡在氯金酸溶液中,使纳米金颗粒还原在电极复合物的表面上,进而制备成表面附着有纳米金颗粒的探针和生物传感器电极夹载外泌体的电化学发光生物传感器,对该电化学发光生物传感器在鲁米诺溶液中进行电化学发光检测。