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专利号: 2018114594855
申请人: 中南林业科技大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种从滇山茶中提取山奈酚葡萄糖苷类化合物的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:

A.将滇山茶茶饼用乙醇水溶液进行超声浸提,得到提取液;将所述提取液减压蒸馏至无醇得到浓缩液;

B.将所述浓缩液加入大孔树脂层析柱,依次用水、20%乙醇、50%乙醇、80%乙醇进行梯度洗脱,经色谱检测,收集含有目标提取物的洗脱液得粗流份段,将所述粗流份段浓缩,得到粗流份段浓缩液;

C.在所述粗流份段浓缩液中加入硅胶,搅拌均匀后烘干得到待处理样品;将所述待处理样品使用干法上样至硅胶层析柱中,用二氯甲烷‑甲醇溶液体系进行梯度洗脱,经色谱检测,收集含有目标提取物的洗脱液得准流份段;减压浓缩、干燥得到粗分离物;

D.使用C18色谱柱、用甲醇‑甲酸水溶液体系作为流动相,将所述粗分离物用溶剂溶解后进样,进行等度洗脱,收集含有目标化合物的流份段,浓缩冻干得到目标化合物,所述目标化合物的结构式为:

其中,所述步骤B中,所述大孔树脂层析柱的柱体积为2L;每500mL收集一次洗脱液并顺次标号,所述粗流份段由第A44‑45号洗脱液合并得到;所述大孔树脂层析柱中的大孔树脂2

的型号为D101,大孔树脂粒径60‑16目、比表面积≥550m/g、酚/干基的比照吸附量≥20mg/g。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述大孔树脂使用前需用乙醇洗脱至颜色清亮,再用纯水洗脱至无醇味。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤C中,所述硅胶层析柱的制作方法为:取硅胶和二氯甲烷溶液混合,超声处理去除气泡后缓慢装入层析柱中,并用压力泵对柱子进行加压处理,得到所述硅胶层析柱。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述步骤C中,所述二氯甲烷‑甲醇溶液体系为:流动相A为二氯甲烷,流动相B为甲醇;所述梯度洗脱的配比为:所述流动相A与所述流动相B的体积比依次为7:1,5:1,3:1,1:1,1:0,每个洗脱梯度洗脱至无色为止。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述步骤C中,每25‑35g所述硅胶对应

100mL所述粗流份段浓缩液;所述烘干的温度为45‑55℃。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述步骤C中,所述硅胶层析柱的柱体积为

1.2L;每200mL收集一次洗脱液并顺次标号,所述准流份段由第C4号洗脱液得到。

7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤D中,所述C18色谱柱的规格为:Venusil MP C18,尺寸10mm×250mm,填料粒径为5微米。

8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述甲醇‑甲酸水溶液体系为:流动相C为甲醇,流动相D为体积分数0.1%的甲酸水溶液;所述等度洗脱的配比为:所述流动相C与所述流动相D的体积比为25:75。

9.根据权利要求1‑8任一项所述的方法,其特征在于,所述乙醇水溶液的体积分数为

50‑60%;所述浸提的方法为:料液比为1kg所述滇山茶茶饼对应3‑4L所述乙醇水溶液,在

30‑40℃条件下超声浸提2‑4次,过滤得到所述提取液。