1.一种牛磺酸修饰的新型阿拉斯加鳕鱼多功能肽的制备方法,包括制备保护性肽片段,微波缩合反应,脱氨基保护反应;
所述制备保护性肽片段的步骤如下:将天然多肽溶于碳酸钠溶液中,然后加入含有氨基端保护基团和促进剂的丙酮溶液,搅拌反应,然后用乙醚萃取,用浓盐酸调节pH至析出沉淀,将沉淀用乙酸乙酯萃取,无水硫酸镁干燥后,再用石油醚析出沉淀,即得;所述天然多肽的氨基酸序列为Leu‑Pro‑His‑Ser‑Gly‑Tyr,分子量为672u;所述氨基端保护基团为芴甲基羰基,其在丙酮溶液中的重量占比为25 35%;所述促进剂包括邻氨基苯磺酸和异烟酰胺,所~
述促进剂中的邻氨基苯磺酸和异烟酰胺在丙酮溶液中的重量占比分别为0.05 0.1%和0.1~ ~
0.15%;
所述微波缩合反应步骤如下:取保护性肽片段和缩合剂,加入二甲基甲酰胺溶解后,再加入牛磺酸,置于微波中反应,反应完成后,抽滤除去滤液,用二氯甲烷清洗1 2次,即得多~
肽粗品。
2.根据权利要求1所述的一种牛磺酸修饰的新型阿拉斯加鳕鱼多功能肽的制备方法,其特征在于:所述天然多肽为阿拉斯加鳕鱼水解蛋白产物。
3.根据权利要求1所述的一种牛磺酸修饰的新型阿拉斯加鳕鱼多功能肽的制备方法,其特征在于:所述搅拌反应为分段反应,其中先于‑4 0℃下反应25 35min后,再于20 30℃~ ~ ~
下反应1.5 2.5h。
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4.根据权利要求1所述的一种牛磺酸修饰的新型阿拉斯加鳕鱼多功能肽的制备方法,其特征在于:所述保护性肽片段和缩合剂的重量比为1:0.8 1.2;所述牛磺酸添加量为保护~
性肽片段重量的1 1.5倍;所述微波反应温度为20 70℃,时间为10 15min。
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5.根据权利要求1所述的一种牛磺酸修饰的新型阿拉斯加鳕鱼多功能肽的制备方法,其特征在于:所述缩合剂选自二环己基碳二亚胺、二异丙基碳二亚胺、1‑羟基苯并三氮唑、N’‑四甲基脲六氟磷酸酯、N‑羟基‑7‑偶氮苯并三氮唑和二异丙基乙基胺中的至少一种。
6.根据权利要求1所述的一种牛磺酸修饰的新型阿拉斯加鳕鱼多功能肽的制备方法,其特征在于:所述脱氨基保护反应步骤如下:向多肽粗品中加入4 5倍量、含20 30%哌啶的~ ~
二氯甲烷溶液,然后置于30 60℃的微波中反应5 15min,反应完成后,向反应液中加入冰乙~ ~
醚进行沉淀,然后离心除去上清液,即得新型多功能肽。