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专利号: 2018114339122
申请人: 上海安民生物技术有限公司
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-05-07
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种以白蛋白启动子驱动的表达载体,其特征在于:所述表达载体包含表达框,所述表达框从5’端到3’端依次包含白蛋白启动子及其第一个内含子、白蛋白基因、内核糖体进入位点序列IRES、第二基因。

2.根据权利要求1所述的表达载体,其特征在于:所述白蛋白启动子是人血清白蛋白启动子。

3.根据权利要求1所述的表达载体,其特征在于:所述白蛋白基因选自人血清白蛋白基因、狗血清白蛋白基因、猫血清白蛋白基因、牛血清白蛋白基因、羊血清白蛋白基因、猪血清白蛋白基因、马血清白蛋白基因、鼠血清白蛋白基因、猴血清白蛋白基因、兔血清白蛋白基因,优选地,所述白蛋白基因是人血清白蛋白基因。

4.根据权利要求1所述的表达载体,其特征在于:所述第二基因是筛选标记基因。

5.根据权利要求4所述的表达载体,其特征在于:所述筛选标记基因选自谷氨酰胺合成酶基因、卡那霉素抗性基因、四环素抗性基因、新霉素磷酸转移酶基因、嘌呤霉素抗性基、绿色荧光蛋白基因、红色荧光蛋白基因。

6.根据权利要求5所述的表达载体,其特征在于:所述筛选标记基因是人谷氨酰胺合成酶基因或绿色荧光蛋白基因。

7.根据权利要求1所述的表达载体,其特征在于:所述表达框还包含其它调控元件。

8.根据权利要求1所述的表达载体,其特征在于:所述表达载体还包含骨架。

9.根据权利要求8所述的表达载体,其特征在于:所述骨架选自逆转录病毒、慢病毒与腺病毒骨架,优选地,所述骨架是慢病毒骨架。

10.根据权利要求1-9任一项所述的表达载体,其特征在于:所述人血清白蛋白启动子及第一个内含子具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列或其变体序列,所述人血清白蛋白基因具有SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列或其变体序列,所述内核糖体进入位点序列IRES具有SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列或其变体序列。

11.根据权利要求5或6所述的表达载体,其特征在于:所述人谷氨酰胺合成酶基因具有SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列或其变体序列,所述绿色荧光蛋白基因具有SEQ ID NO.5所示的核苷酸序列或其变体序列。

12.一种表达细胞,其特征在于:所述表达细胞包含权利要求1-11中任一项所述的表达载体。

13.根据权利要求12所述的表达细胞,其特征在于:所述细胞选自人细胞、猫细胞、狗细胞、牛细胞、羊细胞,优选地,所述细胞是人肾细胞或人肝细胞。

14.一种生产人血清白蛋白的方法,其特征在于:所述方法包括在允许人血清白蛋白表达的条件下,培养权利要求12或13所述的表达细胞,及回收所述人血清白蛋白。

15.一种人血清白蛋白,其特征在于:所述人血清白蛋白由权利要求1-11任一项所述的表达载体或权利要求12-13任一项所述的表达细胞表达,或由权利要求14所述的方法制备而得。

16.白蛋白启动子在驱动白蛋白基因表达中的应用,其特征在于,构建包含白蛋白启动子的表达载体。

17.根据权利要求16所述的应用,其特征在于:所述白蛋白启动子是人血清白蛋白启动子,所述白蛋白是人血清白蛋白。