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专利号: 2018113309435
申请人: 江苏省中国科学院植物研究所
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-08-18
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种提高伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.)HDXY-02 (CGMCC No.14054)毒黄素合成量的培养基和培养条件,其特征在于:菌种为:伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.)HDXY-02(CGMCC No.14054);

优化后的发酵培养基配方:葡萄糖(19.24 g/L)、蛋白胨 (20.45 g/L)、苯丙氨酸(0.472 g/L)、K2HPO4 (1.5 g/L)、MgSO4 (0.75 g/L),初始pH7.0;

优化后的发酵培养条件:种龄14 h,接种量为3%,摇床转速200 rpm,三角瓶装液量75/

250 mL,30℃振荡培养48 h。

2.如权利要求1所述的伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.)HDXY-02的培养基的优化方法,其特征在于包括以下步骤:(1) 利用单因子实验首先从碳源、氮源、无机盐和金属离子等大量因子中筛选出碳源(葡萄糖、甘油),氮源(蛋白胨),无机盐(NaCl、MgSO4、K2HPO4),氨基酸(酪氨酸、天冬氨酸、苯

2+ 2+ 2+

丙氨酸)和金属离子(Fe 、Ca 和Mn )对伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.)HDXY-02发酵上清液中毒黄素的积累具有促进作用;

(2) 采用Plackett-Burman设计来进一步筛选对伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.)HDXY-02毒黄素合成显著影响的因子,筛选出三个因素葡萄糖、蛋白胨和苯丙氨酸为该菌株毒黄素合成的主要影响因素;

(3) 根据Plackett-Burman设计筛选出的主要影响因素进行响应面分析得拟合的二次方程,并最终确定菌株伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.)HDXY-02产毒黄素的发酵培养基各组分水平;最后获得最优配方为:葡萄糖(19.24 g/L)、蛋白胨(20.45 g/L)、苯丙氨酸(0.472 g/L)、K2HPO(4 1.5 g/L)、MgSO4(0.75 g/L);优化后毒黄素的产量较优化前有大幅提高,达到1533 mg/L,较优化前的387 mg/L提高了 296%;10 L发酵罐的放大试验验证结果表明发酵60 h毒黄素产量可达到1.87 g/L。