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专利号: 2018112819248
申请人: 湖北大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2024-12-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.制备pH响应型磁性介孔硅纳米粒子药物控释系统的方法,其特征在于:

S1.制备双硫功能化的磁性介孔硅纳米粒子(MMSN-SS-NH2)

巯基功能化的磁性介孔硅纳米颗粒(CTAB-MMSN-SH)在甲醇中分散均匀;然后加入S-(2-氨乙巯基)-2-巯基吡啶盐酸盐,在室温下反应;将产物离心,并用去离子水和无水乙醇清洗数次,冻干后得到有表面活性剂CTAB的双硫功能化的磁性介孔硅纳米粒子(CTAB-MMSN-SS-NH2);

配置10mg/mL的硝酸铵/乙醇溶液,将CTAB-MMSN-SH分散于之前配置的硝酸铵/乙醇溶液中,升温至50-90℃水浴回流12-96h,产物离心收集后用无水乙醇和去离子水反复洗涤,冻干后得到双硫功能化的磁性介孔硅纳米粒子(MMSN-SS-NH2);

S2.制备羧基功能化的磁性介孔硅纳米粒子(MMSN-SS-COOH)

称取MMSN-SS-NH2,分散在重蒸过的DMSO中,超声分散均匀;然后将三乙胺和丁二酸酐逐滴滴加加入,反应于10-50℃下反应;固体产物离心分离并用甲醇和去离子水清洗数次,冻干后得到羧基功能化的磁性介孔硅纳米粒子(MMSN-SS-COOH);

S3.制备PEI封堵的磁性介孔硅药物控释系统(X@MMSN-SS-PEI)称取MMSN-SS-COOH,加入pH=5.0的PBS缓冲液,超声分散均匀,加入药物X,在常温(25℃)避光条件下,混合液剧烈搅拌;然后,加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐与N-羟基琥珀酸亚胺,在避光条件下4℃下冰浴,剧烈搅拌,即活化完成;

在上一步活化完成后,直接在反应烧瓶中加入含有bPEI(支化聚乙烯亚胺)的pH=7.4的PBS溶液,然后温热至20-40℃,在避光条件下继续搅拌,之后离心收集产物并用去离子水清洗数次,冻干后得到接枝PEI保护的磁性介孔硅药物控释系统(X@MMSN-SS-PEI);

S4.pH响应型磁性介孔硅纳米粒子药物控释系统(X@MMSN-SS-PEI-cit)称取X@MMSN-SS-PEI,分散在去离子水后,通过加入NaOH溶液将溶液pH调节至7.5-9.5,然后在室温下搅拌,逐滴缓慢滴加柠康酸酐DM,并通过滴加NaOH使溶液pH保持在8-9的范围;

当pH值稳定时,反应在室温下继续过夜,产物离心并用去离子水洗涤数次,冷冻干燥后得到pH响应型磁性介孔硅纳米粒子药物控释系统(X@MMSN-SS-PEI-cit);

所述支化聚乙烯亚胺的重均分子量15000-35000。

2.根据权利要求1所述的制备pH响应型磁性介孔硅纳米粒子药物控释系统的方法,其特征在于:所述巯基功能化的磁性介孔硅纳米颗粒(CTAB-MMSN-SH)的制备方法包括:S01.制备四氧化三铁纳米粒子(OA-Fe3O4)

OA-Fe3O4的制备步骤如下:将FeCl3·6H2O与FeCl2·4H2O依次溶解在80mL去离子水中,在氮气氛围下加热至50-100℃,剧烈搅拌0.1-1.0h;之后逐滴滴加NH3·H2O溶液(25wt%),剧烈搅拌所得悬浮液,再加入油酸,让该反应继续搅拌2-40min,得到粗产物;

所得粗产物通过磁体分离,得到上层无色溶液与焦油状黑色磁性凝胶沉淀,将磁性凝胶用去离子水与乙醇反复洗涤后,在真空干燥室中干燥,即可获得油酸稳定的四氧化三铁纳米粒子(OA-Fe3O4);

S02.制备磁性介孔硅纳米颗粒(CTAB-MMSN)

将OA-Fe3O4分散在氯仿中,然后加入到含有CTAB的去离子水溶液中,剧烈搅拌所得溶液后,在30-80℃下加热5-20min以蒸发混合物中的氯仿,得到水溶液A;然后用去离子水稀释上述水溶液A,在20-60℃下剧烈搅拌;

之后,依次加入浓度25wt%的NH3·H2O溶液、TEOS和乙酸乙酯,剧烈搅拌该混合物,然后调节转速至50-100r/min,继续在30-50℃下反应,使产物老化;之后离心收集沉淀,并分别用甲醇和水清洗数次,冻干后就得到有表面活性剂CTAB的磁性介孔二氧化硅纳米颗粒(CTAB-MMSN);

S03.制备巯基功能化的磁性介孔硅纳米颗粒(CTAB-MMSN-SH)

称取CTAB-MMSN分散于无水甲醇中,加入MPTMS(3-巯基丙基三甲氧基硅烷)后,剧烈搅拌,反应12-48h,离心收集产物并用无水甲醇反复洗涤,冻干后即可得到巯基功能化的磁性介孔硅纳米颗粒(CTAB-MMSN-SH)。

3.根据权利要求1所述的制备pH响应型磁性介孔硅纳米粒子药物控释系统的方法,其特征在于:所述S-(2-氨乙巯基)-2-巯基吡啶盐酸盐制备方法为:将2,2-二硫二吡啶20.0mmol溶解在20ml无水甲醇和8ml乙酸中,形成溶液a;再将半胱胺盐酸盐100.0mmol溶解在10ml无水甲醇中,形成溶液b;

将溶液b逐滴滴加至溶液a中,要求在30min内滴完;在室温下搅拌反应48h后,用旋转蒸发仪浓缩旋干,得到黄色油状物,溶解在10ml无水甲醇中,并用200ml乙醚沉淀三次后,真空干燥。

4.根据权利要求1所述的制备pH响应型磁性介孔硅纳米粒子药物控释系统的方法,其特征在于:步骤S1中,所述巯基功能化的磁性介孔硅纳米颗粒与S-(2-氨乙巯基)-2-巯基吡啶盐酸盐的质量比为800:600-800;

步骤S2中,MMSN-SS-NH2、三乙胺和丁二酸酐的质量比为1:2-4:2-4;

步骤S3中,MMSN-SS-COOH、药物X、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酸亚胺的质量比为:1:0.01-0.5:3-6:2-4;支化聚乙烯亚胺的用量质量为MMSN-SS-COOH的5-15倍;

步骤S4中,X@MMSN-SS-PEI与柠檬酸酐的比例为0.2: 2,比例单位为mg:mL。

5.根据权利要求2所述的制备pH响应型磁性介孔硅纳米粒子药物控释系统的方法,其特征在于:步骤S01中,FeCl3·6H2O与FeCl2·4H2O的质量比为2:0.5-1.5,;

步骤S02中,OA-Fe3O4、CTAB、TEOS和乙酸乙酯的比例为7.5:

0.05-0.2:0.1-1:2-10,比例的单位为mg:g:ml:ml;

S03步骤中,CTAB-MMSN与MPTMS的比例为1:0.2-2,比例单位为g:ml。

6.根据权利要求1所述的制备pH响应型磁性介孔硅纳米粒子药物控释系统的方法,其特征在于:所述X为盐酸阿霉素(DOX·HCl)。

7.权利要求1-6任一所述的制备pH响应型磁性介孔硅纳米粒子药物控释系统的方法得到的pH响应型磁性介孔硅纳米粒子药物控释系统。