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专利号: 2018111141641
申请人: 南京师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-08-18
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种猫B淋巴细胞刺激因子cDNA,其特征在于,其碱基序列如SEQ ID NO.1所示。

2.一种权利要求1所述的猫B淋巴细胞刺激因子cDNA编码的蛋白,其特征在于,其氨基酸序列为 SEQ ID NO.2。

3.一种权利要求1所述的猫B淋巴细胞刺激因子cDNA的克隆方法,其特征在于,包括如下:

(1)TRIzol法提取猫脾脏总RNA;

(2)根据B淋巴细胞刺激因子的保守序列设计简并引物;

(3)通过RT‑PCR方法,扩增出P1片段,用BLAST软件进行同源性分析,判断该扩增片段为BAFF基因家族;

(4)根据以上扩增出的P1片段设计特异性引物,通过RACE PCR 克隆猫全长BAFF的 cDNA。

4.根据权利要求3所述的克隆方法,其特征在于,步骤(2)所述的简并引物为cBAFF1和cBAFF2,其碱基序列如SEQ ID NO.3‑4所示。

5.根据权利要求3所述的克隆方法,其特征在于,步骤(4)所述的特异性引物为3'GSP1、

3'GSP2、5'GSP1和5'GSP2,其碱基序列如SEQ ID NO.5‑8所示。

6.根据权利要求3所述的克隆方法,其特征在于,步骤(4)所述克隆全长BAFF cDNA后设计引物CB‑1和CB‑2扩展全长的猫cBAFF,所述CB‑1和CB‑2其序列SEQ ID NO.9‑10所示。

7.一种含有编码权利要求 1 所述的猫B淋巴细胞刺激因子cDNA的胞外可溶区的碱基序列的重组载体pSUMO‑csBAFF,所述重组载体pSUMO‑csBAFF的特异性PCR扩增引物为P1和P2 ,其碱基序列分别为SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.14。

8.一种使用权利要求 7 所述的含有编码猫B淋巴细胞刺激因子cDNA的胞外可溶区的碱基序列的重组载体表达的融合蛋白SUMO‑csBAFF。

9.一种权利要求1所述的猫B淋巴细胞刺激因子cDNA及其生产的重组猫B淋巴细胞刺激因子胞外可溶区蛋白csBAFF在制备猫类免疫增强剂中的应用。