1.一种猫B淋巴细胞刺激因子cDNA,其特征在于,其碱基序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种权利要求1所述的猫B淋巴细胞刺激因子cDNA编码的蛋白,其特征在于,其氨基酸序列为 SEQ ID NO.2。
3.一种权利要求1所述的猫B淋巴细胞刺激因子cDNA的克隆方法,其特征在于,包括如下:
(1)TRIzol法提取猫脾脏总RNA;
(2)根据B淋巴细胞刺激因子的保守序列设计简并引物;
(3)通过RT‑PCR方法,扩增出P1片段,用BLAST软件进行同源性分析,判断该扩增片段为BAFF基因家族;
(4)根据以上扩增出的P1片段设计特异性引物,通过RACE PCR 克隆猫全长BAFF的 cDNA。
4.根据权利要求3所述的克隆方法,其特征在于,步骤(2)所述的简并引物为cBAFF1和cBAFF2,其碱基序列如SEQ ID NO.3‑4所示。
5.根据权利要求3所述的克隆方法,其特征在于,步骤(4)所述的特异性引物为3'GSP1、
3'GSP2、5'GSP1和5'GSP2,其碱基序列如SEQ ID NO.5‑8所示。
6.根据权利要求3所述的克隆方法,其特征在于,步骤(4)所述克隆全长BAFF cDNA后设计引物CB‑1和CB‑2扩展全长的猫cBAFF,所述CB‑1和CB‑2其序列SEQ ID NO.9‑10所示。
7.一种含有编码权利要求 1 所述的猫B淋巴细胞刺激因子cDNA的胞外可溶区的碱基序列的重组载体pSUMO‑csBAFF,所述重组载体pSUMO‑csBAFF的特异性PCR扩增引物为P1和P2 ,其碱基序列分别为SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.14。
8.一种使用权利要求 7 所述的含有编码猫B淋巴细胞刺激因子cDNA的胞外可溶区的碱基序列的重组载体表达的融合蛋白SUMO‑csBAFF。
9.一种权利要求1所述的猫B淋巴细胞刺激因子cDNA及其生产的重组猫B淋巴细胞刺激因子胞外可溶区蛋白csBAFF在制备猫类免疫增强剂中的应用。