1.一种冻融次数的判定方法，其特征在于，采用以下步骤：(1)测定凝乳酶溶液的酶活力；

(2)将步骤(1)所述凝乳酶溶液密封放置于待测冻品中，和冻品一起冻融后，再次测定该酶的酶活，通过两次酶活的差别判断冻融的次数；

步骤(2)所述的冻融一次为凝乳酶溶液于‑20℃冰箱冷冻2小时至完全冷冻，然后20℃水浴锅水浴70min至完全融化，轻轻晃动混匀为一次冻融过程；

所述冻融次数具体的计算方法为：

(1)测定未经冻融的凝乳酶活力A0；

(2)分别测定经过2、4、6、8、10次冻融后的凝乳酶残余活力An，根据凝乳酶残余活力和冻融次数的关系建立方程(Ⅰ)；

An＝A0‑nx (Ⅰ)

其中An为冻融过n次的凝乳酶酶活力；n为冻融次数，x为每次冻融所致酶活力损失；

(3)检测经过n次冻融的凝乳酶残余活力，通过凝乳酶残余活力方程(Ⅰ)计算冻融的次数n。

2.根据权利要求1所述的判定方法，其特征在于，步骤(1)所述的凝乳酶溶液所用的凝乳酶为纯酶粉；所述凝乳酶溶液的配制方法为以20mmol/L pH6.0的磷酸二氢钾‑磷酸氢二钾缓冲液稀释。

3.一种冻融次数的判定方法，其特征在于，采用以下步骤：(1)测定凝乳酶的失活活化能；

(2)将步骤(1)所述的凝乳酶密封放置于待测冻品中，和冻品一起冻融后，再次测定该酶的失活活化能，根据失活活化能的变化，得到凝乳酶冻融的次数，判断冻品的冻融次数；

步骤(2)所述的冻融一次为凝乳酶溶液于‑20℃冰箱冷冻2小时至完全冷冻，然后20℃水浴锅水浴70min至完全融化，轻轻晃动混匀为一次冻融过程；

所述冻融次数具体计算方法为：

(1)测定酶液在绝对温度323K‑331K下保温0‑300min后的相对酶活力Ar，以相对酶活力的对数lnAr对保温时间t作图，并建立方程(Ⅱ)相对活力Ar＝残余活力Al/初始活力A0×100％lnAr＝‑kt (Ⅱ)

其中，k为失活速率常数，t为保温时间；

(2)根据酶液不同温度下lnAr线性回归的斜率k与相关系数R2，根据绝对温度的倒数1/T与斜率k对数的关系建立方程(Ⅲ):(3)根据方程(Ⅲ)分别计算得到酶液在冻融2、4、6、8、10次后的失活活化能Ea；并根据失活活化能Ea与冻融次数的关系建立失活活化能方程(Ⅳ)；

Ea’＝Ea‑n*ΔE (Ⅳ)

其中，Ea’为冻融n次凝乳酶的失活活化能；Ea为未经冻融的失活活化能，ΔE为每次冻融凝乳酶失活活化能的差值；

(5)检测经过n次冻融的失活活化能Ea，通过失活活化能方程(Ⅳ)计算冻融的次数n。