1.特异调控木质素S/G值的miRNA PtomiR6443在调控木质素S/G值中的应用,所述PtomiR6443的核糖核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.PtomiR6443的反义链在调控木质素S/G值中的应用,所述PtomiR6443的核糖核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,所述反义链的脱氧核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
3.包含PtomiR6443的反义链的载体在调控木质素S/G值中的应用,所述载体为干扰抑制载体,所述PtomiR6443的核糖核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,所述反义链的脱氧核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
4.如权利要求3所述应用,其特征在于,所述干扰抑制载体包含脱氧核苷酸序列I,所述核苷酸序列I包含一段含有CTA插入位点的PtomiR6443的反义链,其序列如SEQ ID No.3所示。
5.如权利要求3所述应用,其特征在于,所述核苷酸序列I还包含另一段含有CTA插入位点的PtomiR6443的反义链,两段反义链之间通过spacer连接,spacer的脱氧核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。
6.如权利要求5所述应用,其特征在于,所述脱氧核苷酸序列I为STTM6443,其脱氧核苷酸序列如SEQ ID No.5所示。
7.一种利用干扰抑制载体调控木质素S/G值的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1:构建植物表达载体:人工合成核苷酸序列STTM6443,所述的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示;将STTM6443构建在pMD19载体上,pMD19转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,摇菌扩大培养,提取质粒,用BamHI单酶切,得到目的条带,载体pCambia1305用BamH I酶切后与目的条带连接,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,通过PCR扩增目的基因片段和酶切验证,得到包含STTM6443-pCambia1305的重组质粒;将含有STTM6443-pCambia1305重组质粒的大肠杆菌,摇菌扩大培养,提取质粒,转化农杆菌菌株GV3101,获得PtomiR6443干扰抑制载体STTM6443;
步骤2:毛白杨的遗传转化:转化材料为无菌的幼嫩的野生型毛白杨叶片,采用农杆菌介导的叶盘法转化,转化PtomiR6443干扰抑制载体STTM6443后,培养获得转基因植株。