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专利号: 2018109206262
申请人: 江苏科技大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-07-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种基于脱氧核酶修饰的磁珠颗粒用于锌离子检测的荧光方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)取链霉亲和素包被磁珠(MBs),离心,磁力架放置,将沉淀物用偶联缓冲液洗涤后,分散在偶联缓冲液中,加入生物素和FAM荧光素双标记的寡核苷酸序列为5’-/5Biotin/TTTTTTTTTACTCACTAT/rA/GGAAGAGATG-FAM-3’的Zn-Sub链,涡旋,离心,磁力架放置,分离出沉淀物,得Zn-Sub-MB缀合物;

(2)用剪切缓冲液将Zn-Sub-MB缀合物洗涤后,分散在剪切缓冲液中,配制成Zn-Sub-MB缀合物溶液;

(3)将寡核苷酸序列为5’-CATCTCTTCTCCGAGCCGGTCGAAATAGTGAGT-3’的Zn-Enz链和不同浓度的ZnCl2溶液加入到上述Zn-Sub-MB缀合物溶液中,孵化,离心,磁力架放置,取上清液,在荧光素的最大激发波长检测荧光强度,绘制锌离子与荧光强度相关的标准曲线;

(4)检测时,将寡核苷酸序列为5’-CATCTCTTCTCCGAGCCGGTCGAAATAGTGAGT-3’的Zn-Enz链和含有锌离子的待测物加入到上述Zn-Sub-MB缀合物溶液中,孵化,离心,取上清液,检测其中荧光素的荧光强度,从上述标准曲线上计算待测物中锌离子浓度。

2.根据权利要求1所述的基于脱氧核酶修饰的磁珠颗粒用于锌离子检测的荧光方法,其特征在于,步骤(1)中所述偶联缓冲液为:0.01M PBS,30mM NaCl,0.1%tween-20,pH7.4。

3.根据权利要求1所述的基于脱氧核酶修饰的磁珠颗粒用于锌离子检测的荧光方法,其特征在于,步骤(2)中所述剪切缓冲液为:0.01M PBS,70.53mM NaCl,0.1%tween-20,pH7.85。