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专利号: 2018104998833
申请人: 淮阴工学院(CN)
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2024-12-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种中草药内生真菌发酵的中草药饲料添加剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:S1:使用由野马追、益母草、穿心莲和瓜篓四种中草药配制成的中草药复方分别制备中草药浸煮液和发酵培养基;

S2:使用所述中草药浸煮液配制真菌分离培养基;

S3:将切碎的四种中草药的新鲜植株置于所述真菌分离培养基上培养至切口处长出菌丝;

S4:将所述菌丝转接至添加有20%所述中草药浸煮液的所述真菌分离培养基上培养出内生真菌菌株,并筛选出生长良好的内生真菌菌株;

S5:将筛选出的内生真菌菌株接种于液体种子培养基上培养出种子液;

S6:将所述种子液接种到所述发酵培养基上进行发酵,得中草药饲料添加剂。

2.根据权利要求1所述的中草药内生真菌发酵的中草药饲料添加剂的制备方法,其特征在于,在所述S1中,所述中草药复方中,野马追、益母草、穿心莲和瓜篓四种中草药的质量比为1:1:1:1。

3.根据权利要求1所述的中草药内生真菌发酵的中草药饲料添加剂的制备方法,其特征在于,在所述S1中,所述中草药浸煮液的配制方法如下:将所述中草药复方粉碎至40目,加入20倍的蒸馏水,煎煮30 min后粗过滤,取滤液于

8000r/min离心15min,取上清液,减压浓缩5倍后得所述中草药浸煮液。

4.根据权利要求1所述的中草药内生真菌发酵的中草药饲料添加剂的制备方法,其特征在于,在所述S1中,所述发酵培养基的组成为:中草药复方70%,麦麸25%,葡萄糖3%,(NH4)

2SO4 1.5%,KH2PO4 0.3%,MgSO4 0.2%以及水50-60%。

5.根据权利要求1所述的中草药内生真菌发酵的中草药饲料添加剂的制备方法,其特征在于,在所述S2中,所述真菌分离培养基的配制方法如下:在马丁氏固体培养基中加入5%所述中草药浸煮液的所述真菌分离培养基,pH自然。

6.根据权利要求1所述的中草药内生真菌发酵的中草药饲料添加剂的制备方法,其特征在于,在所述S5中,所述液体种子培养基的组成为:葡萄糖5%,豆饼粉1.5%,酵母粉0.5%,KH2PO4 0.2%,MgSO4·7H2O 0.1%,CaCO3 0.4%。

7.根据权利要求1所述的中草药内生真菌发酵的中草药饲料添加剂的制备方法,其特征在于,在所述S5中,所述种子液的培养条件为:28℃,180 r/min,72h。

8.根据权利要求1所述的中草药内生真菌发酵的中草药饲料添加剂的制备方法,其特征在于,在所述S6中,所述发酵培养基的含水量为50 60%,pH自然,灭菌30 min后,将所述种~子液按体积质量比为10%的接种量接种到所述发酵培养基上,32℃发酵72h后,50℃烘干,得所述中草药饲料添加剂。