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专利号: 2018104924971
申请人: 西南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.SlSL4基因在调控番茄果实成熟中的应用,其特征在于,所述SlSL4基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,SlSL4基因在番茄中表达量随着果实发育逐渐升高,在果实破色期表达量达到最高,在果实成熟过程中其表达量又降低。

3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,SlSL4基因通过调控番茄果实成熟相关基因的表达来调控番茄果实的成熟,所述番茄果实成熟相关基因包括ACO1,ACO3,ACS2,E4,E8,ERF1。

4.一种控制番茄果实成熟进程的方法,其特征在于,包括以下步骤:

1)超表达载体的构建:将SlSL4基因片段通过PCR扩增克隆出SlSL4基因超表达片段,通过限制性内切酶双酶切SlSL4基因超表达片段和载体,然后将酶切后的目的片段和载体片段通过T4连接酶进行连接,获得超表达载体;

2)将构建好的超表达载体转化到根癌农杆菌LBA4404中,利用农杆菌介导的遗传转化法转化番茄植株,利用荧光定量PCR技术(qRT-PCR)筛选SlSL4基因超表达株系,得延迟成熟的转基因番茄植株。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤1)中所用的载体为PVCT2024,限制性内切酶为BamHI和SacI。

6.权利要求4所述的方法中得到的超表达载体在控制呼吸跃变型果实成熟进程中的应用,其特征在于,所述呼吸跃变型果实包括番茄。

7.番茄果实中SlSL4基因定量测定的方法,其特征在于,所述方法以待测样品提取RNA后反转录成的cDNA为模板,以SlCAC基因为内标,进行qRT-PCR反应;反应后扫描荧光,用2-ΔΔCt计算方法进行数据处理,得番茄果实中SlSL4基因的表达水平。

8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,SlSL4基因的引物序列如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示;SlCAC基因的引物序列如SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示。

9.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述qRT-PCR反应的条件为:94℃30s后94℃3min,56~65℃30s,40个循环后,65-95℃3s解链。