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专利号: 2018101460320
申请人: 陕西师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种用于快速检测非稳定物质的电化学传感器,其特征在于该电化学传感器由以下步骤制得:

(1)将浓度均为1μmol/L的anti-ATP适配体与其互补链混合置于含有1mmol/L的三(2-羧乙基)膦和1mol/L的NaClO4的磷酸缓冲溶液中,加热至70~90℃,缓慢冷却至室温,得到dsDNA;(2)将Pt圆盘超微电极用超纯水超声清洗,以该Pt圆盘超微电极为工作电极,放入含有质量浓度为1.5%HCl与浓度为1.2mg/mL HAuCl4及0.1mol/L NaCl的混合液中,用循环伏安扫描法在Pt圆盘超微电极上电沉积Au,得到Au纳米花超微电极,所述Au纳米花超微电极的尺寸不超过25μm;

(3)将步骤(2)的Au纳米花超微电极放入0.5mol/L的H2SO4中,利用循环伏安扫描法进行电化学清理,直至扫描的峰电流稳定,之后再用超纯水反复清洗后,完成Au纳米花超微电极的预处理;

(4)将步骤(3)预处理好的Au纳米花电极置于步骤(1)的dsDNA中,反应10h~16h后,使dsDNA组装至Au纳米花电极上,得到用于快速检测非稳定物质的电化学传感器。

2.根据权利要求1所述的用于快速检测非稳定物质的电化学传感器,其特征在于:步骤(1)和步骤(4)中的磷酸缓冲溶液的pH均为7.4。

3.根据权利要求1所述的用于快速检测非稳定物质的电化学传感器,其特征在于所述步骤(1)的anti-ATP适配体的序列为:

5’-ferrocene-C6-ACCTGGGGGAGTATTGCGGAGGAAGGTTT-C6-SH-3’;

互补链的序列为:

5'-ACCTTCC TCCGC AATAC TCCCC CAGGT-3'。

4.根据权利要求1所述的用于快速检测非稳定物质的电化学传感器,其特征在于所述步骤(2)中的Pt圆盘超微电极的制备方法为:截取一段Pt微米线置于石英玻璃管中,将石英玻璃管的一端用环氧树脂胶封住,将放有Pt微米线的石英玻璃管放入P-2000激光拉制仪中,使Pt微米线处于激光加热中心,向石英玻璃管中抽入真空,在抽真空状态下,通过激光加热,以每加热45s冷却15s的加热方式,重复7-8次,使得Pt微米线被紧封于石英玻璃管中;

重复进行第二次激光加热,使得被紧封于石英管玻璃中的Pt线与石英管玻璃同时被拉成两节;将拉制好的紧封于石英玻璃管里的Pt微米线的一端用导电银胶与0.2mm钨丝沾粘上,并用环氧树脂将石英管口封住,将拉制的尖端打磨,使得Pt尖端暴露,得到Pt圆盘超微电极。

5.根据权利要求4所述的用于快速检测非稳定物质的电化学传感器,其特征在于激光加热时,第一次激光加热条件为:温度参数=829,火焰间距参数=2,速度参数=60,延迟参数=140,拉力参数=225;第二次激光加热条件为:加热参数=876,火焰间距参数=2,速度参数=60,延迟参数=100,拉力参数=229。

6.根据权利要求1所述的用于快速检测非稳定物质的电化学传感器,其特征在于所述步骤(2)的循环伏安扫描法的扫描范围从0.4V至-0.5V,扫描速度为20mV/s,两电极体系为vs.Ag/AgCl;

所述步骤(3)的循环伏安扫描法的扫描范围从0V至1.5V,扫描速度为30mV/s,两电极体系为vs.Ag/AgCl。

7.一种利用权利要求1所述的用于快速检测非稳定物质的电化学传感器进行ATP快速定量检测的方法,具体是:将权利要求1所述的用于快速检测非稳定物质的电化学传感器置于含有0.1mol/L的2-巯基乙醇和1mol/L NaClO4的磷酸缓冲溶液中后处理8min~12min,使电极表面的活性位点被封闭;之后在36℃~38℃条件下,将该用于快速检测非稳定物质的电化学传感器放入待检ATP溶液中培育8min~12min,利用方波伏安法测定,实现ATP的定量检测。

8.根据权利要求7所述的ATP快速定量检测方法,其特征在于所述ATP溶液是溶于含有

50mmol/L NaClO4和1mmol/L 4-羟乙基哌嗪乙磺酸、pH=8.0的缓冲溶液。

9.根据权利要求8所述的ATP快速定量检测方法,其特征在于:所述ATP溶液浓度的检测-9 -6范围为1.0×10 ~1.0×10 mol/L。