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专利号: 2017110121913
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2024-12-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种基于大分子自组装制备糖蛋白印迹荧光纳米粒子的方法,其特征在于具体步骤如下:

第一步:含硼酸基元的可光交联双亲无规共聚物的制备

将荧光单体乙烯基咔唑(NVC)、亲水单体、识别单元及引发剂溶解在溶剂中,通N2除去体系中的氧气,将反应体系移入油浴中,在60~100℃下搅拌,反应8~24h;亲水单体是丙烯酸、甲基丙烯酸中的一种,识别单元是3-乙烯基苯硼酸、4-乙烯基苯硼酸、甲基丙烯酸苯硼酸酯中的一种,乙烯基咔唑与亲水单体的摩尔比为1:5~1:1,乙烯基咔唑与识别单元的摩尔比为1∶0.1~1∶0.05;

然后,向反应溶液中加入甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)、三苯基膦和对苯二酚的混合溶液,在80~120℃下反应8~24h,通过沉淀,真空烘箱干燥过夜得到含苯硼酸可光交联双亲无规共聚物,其分子量在5000~20000;亲水单体和甲基丙烯酸缩水甘油酯的摩尔比为2∶1~1∶3,三苯基膦和甲基丙烯酸缩水甘油酯的摩尔比为0.02∶1~0.06∶1,对苯二酚和甲基丙烯酸缩水甘油酯的摩尔比为0.005∶1~0.015∶1;

第二步:糖蛋白印迹荧光纳米粒子的制备

将第一步所得到的含硼酸基元可光交联双亲无规共聚物溶解在溶剂中,并向其中加入交联剂和光引发剂,向上述混合溶液中滴加糖蛋白水溶液诱导含硼酸基元可光交联双亲无规共聚物与糖蛋白、交联剂及光引发剂共组装得到纳米粒子,将上述纳米粒子置于紫外点光源下照射15~30min,再将其反滴定入5~10倍体积的水中,搅拌过夜;可光交联双亲无规共聚物的浓度为3~10mg mL-1,糖蛋白水溶液的浓度为0.05~0.6mg mL-1,糖蛋白与含硼酸基元可光交联双亲无规共聚物的摩尔比为1:100~1:50,含硼酸基元可光交联双亲无规共聚物与交联剂的摩尔比为30:1~50:1,含硼酸基元可光交联双亲无规共聚物与光引发剂的摩尔比为100:1~80:1;

第三步:模板分子的洗脱

向上述水分散液中加入醋酸,洗脱30~60min,离心,再用洗脱液对其进行洗涤,直至上层清液中没有糖蛋白的紫外吸收,将离心所得沉淀重新分散于水中得到悬浮液,调节pH使得其由悬浮液变为澄清透明的分散液,分散液的pH为5~12,其可用于对水相中相应糖蛋白的识别与检测。

2.根据权利要求1所述的一种基于大分子自组装制备糖蛋白印迹荧光纳米粒子的方法,第二步中溶剂可以是N,N-二甲基甲酰胺、四氢呋喃、二氯甲烷中的一种,交联剂可以是对苯乙烯、二甲基丙烯酸乙二醇酯中的一种,光引发剂可以选择二芳基碘鎓盐、2-羟基-2-甲基-1-苯基丙酮、安息香二甲醚、苯甲酰甲酸甲酯中的一种。

3.根据权利要求1所述的一种基于大分子自组装制备糖蛋白印迹荧光纳米粒子的方法第三步中洗脱液是水:乙酸(1:1~1:100/v:v)、甲醇:乙酸(1:1~1:100/v:v)中的一种。