1.一种无酶标记DNA逻辑体系检测miRNA的方法，其特征是包括以下步骤：

1.1主要溶液的配制

Tris-EDTA-KCl 缓冲液：取0.0605 g 三羟甲基氨基甲烷，0.0146 g 乙二胺四乙酸，

5.84 g 氯化钠，0.375 g 氯化钾，用灭菌水溶解，定容至50 mL容量瓶中，于4 ℃环境保存备用，使用时pH调至8.0；

6 mM 原卟啉溶液：取0.1879 g原卟啉，用灭菌水溶解，定容至50 mL 容量瓶中,于4 ℃环境保存避光备用，全程在避光条件下进行；

10 % 过硫酸铵：取0.2 g过硫酸铵，加入2 mL 灭菌水，混匀，于4 ℃环境保存备用；

1.2探针设计

根据目标物序列设计出相应的G1、G2和I链，G1、G2富含G碱基构成G-四链体部分，目标物及I链具有必需部分，发挥着启动链置换反应的作用，这两部分是体系中固定不变的，链中的其他序列根据目标miRNA的不同进行相应的设计；

1.3构建DNA逻辑体系

无RNA酶环境下，将所使用的目标物miRNA、G1和G2分别离心，低温操作，向离心管中加入15 μL TEK缓冲液，1 μM G1、G2和目标物miRNA各10 μL，混匀，离心；

1.4荧光检测

进行荧光强度信号测试，激发波长固定为410 nm，发射波长为550—750 nm，激发狭缝宽度为20 nm，发射狭缝宽度为20 nm；

上述溶液加热到88 ℃，反应10分钟，缓慢降至室温，加入5 μL 6 mM原卟啉溶液，室温下反应1小时，进行YES门荧光强度信号测试，管中加入10 μL的4 μ M I链，室温下反应1小时，进行NOT门荧光强度信号测试。

2.根据权利要求1所述，一种无酶标记DNA逻辑体系检测miRNA的方法，其特征在于，利用原卟啉与G-四链体结合后荧光强度会明显上升的特点，将光学信号作为最后输出建立DNA逻辑体系。

3.根据权利要求1所述，一种无酶标记DNA逻辑体系检测miRNA的方法，其特征在于，无需加入相应的标记和特异性酶，使得构建相对简单而且成本低廉。

4.根据权利要求1所述，一种无酶标记DNA逻辑体系检测miRNA的方法，其特征在于，通过必需部分控制启动链置换反应，破坏之前构建的G-四链体结构，使得荧光强度大幅下降。