1.一种假秦艽的组培育苗方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1、脱毒:将假秦艽的外植体放置于0.05~0.3%(m/v)氯化汞溶液中消毒3~30分钟,然后无菌水清洗0~5次;
S2、脱分化:将消毒后的外植体置于含2,4-D 0.2~2mg/L的植物组培培养基上,先进行
5~10天暗培养,然后改为有光培养,10~50天后转至含6-BA 0.3~1mg/L的植物组培培养基上培养,重复此步骤5~8次完成脱分化;
S3、增殖培养:将脱分化后的组织置于含6-BA 0.2~1.0mg/L、萘乙酸0.05~0.5mg/L的植物组培培养基中,于15~28℃、光照强度1000~5000Lx、光照时间8~20h/天的条件下培养;
S4、再分化:将增殖后的组织转接到含萘乙酸0.2~1.0mg/L、吲哚丁酸0.05~2.0mg/L和吲哚乙酸1~10mg/L的植物组培培养基中,在15~28℃、光照强度1000~5000Lx、光照时间8~20h/天的条件下培养10~20天,得生根苗;
S5、炼苗:将生根苗从培养瓶中取出,用清水将根部洗净,移栽至pH值为5~8、EC值为
500~25000μS/cm的营养土中,光照强度2000~20000Lx,炼苗15~25天;
步骤S1中所述的外植体为叶片、叶柄或种子;
所述植物组培培养基为MS培养基、N6培养基或B5培养基。
2.根据权利要求1所述的假秦艽的组培育苗方法,其特征在于,所述叶片和叶柄置于
0.05~0.3%(m/v)氯化汞溶液中消毒3~8分钟,所述种子置于0.05~0.3%(m/v)氯化汞溶液中消毒10~30分钟。
3.根据权利要求2所述的假秦艽的组培育苗方法,其特征在于,所述叶片和叶柄置于
0.05~0.3%(m/v)氯化汞溶液中消毒5~6分钟,所述种子置于0.05~0.3%(m/v)氯化汞溶液中消毒15~20分钟。
4.根据权利要求1所述的假秦艽的组培育苗方法,其特征在于,所述植物组培培养基为MS培养基。
5.根据权利要求1所述的假秦艽的组培育苗方法,其特征在于,在步骤S2中,所述植物组培培养基中2,4-D的含量为0.2~0.5mg/L、6-BA的含量为0.4~0.5mg/L;所述暗培养为6~8天,培养温度为15℃。
6.根据权利要求5所述的假秦艽的组培育苗方法,其特征在于,在步骤S3中,所述植物组培培养基中6-BA的含量为0.4~0.5mg/L、萘乙酸的含量为0.2mg/L;培养温度为有光照时
18℃、无光照时15℃;光照强度为5000Lx;光照时间为14小时。
7.根据权利要求6所述的假秦艽的组培育苗方法,其特征在于,在步骤S4中,所述植物组培培养基中萘乙酸的含量为0.5~0.6mg/L、吲哚丁酸的含量为0.8~1.2mg/L、吲哚乙酸的含量为5~8mg/L;有光照时温度为18℃,无光照时温度为15℃;光照强度为5000Lx;光照时间为14小时。
8.根据权利要求7所述的假秦艽的组培育苗方法,其特征在于,在步骤S5中,所述pH值5~6;所述EC值为800~1200μS/cm;光照强度为10000~20000Lx。