1.一种利用桦褐孔菌固体发酵农林废弃物生产酸性纤维素酶的工艺,其特征在于,包括如下步骤:(1)菌种活化:以桦褐孔菌为菌种,接种至斜面菌种培养基上培养,获得活化菌种;
(2)液体菌种培养:将活化菌种转入种子培养基中,28℃下摇床转速150转/分钟的条件下摇床培养3天得液体菌种;
(3)固体发酵:将液体菌种接种至固体发酵培养基中,控制初始pH至3.5-9.0,24-32℃下发酵培养10-15天;所述固体发酵培养基由农林废弃物与营养盐溶液按 1g:1-4mL的配比, pH 6.0,充分搅拌,121℃湿热灭菌20min而得;
(4)酸性纤维素酶分离:发酵结束后,按照每1g发酵产物干重加10mL醋酸-醋酸钠缓冲液的配比加入浓度50mM的 pH5.0醋酸-醋酸钠缓冲液,搅拌混合均匀,在28℃下振荡浸提
1h,4000r/min离心5min,透析,冷冻干燥。
2.根据权利要求1所述的一种利用桦褐孔菌固体发酵农林废弃物生产酸性纤维素酶的工艺,其特征在于,所述农林废弃物为麸皮、玉米芯、榉木、柚子皮、豆粕、甘蔗渣、木薯皮、花生壳中的一种或几种。
3.根据权利要求1所述的一种利用桦褐孔菌固体发酵农林废弃物生产酸性纤维素酶的工艺,其特征在于,所述的营养盐溶液配方为:(NH4)2SO4 1.7g,KH2PO4 2g,CaCl2 0.3g,蛋白胨1 g, Tween-80 2mL,MgSO4 0.3 g, 蒸馏水1000mL,微量元素混合液1mL;所述微量元素混合液每毫升含:FeSO4 0.005mg,MnSO4 0.002mg, ZnSO4·7H2O 0.0016mg,CoCl2
0.0014mg。
4.根据权利要求1所述的一种利用桦褐孔菌固体发酵农林废弃物生产酸性纤维素酶的工艺,其特征在于,步骤(3)中液体菌种的接种量为每1g农林废弃物加0.1-0.8mL。
5.根据权利要求1所述的一种利用桦褐孔菌固体发酵农林废弃物生产酸性纤维素酶的工艺,其特征在于,所述种子培养基组成为:KH2PO4 0.3g,MgSO4 0.2 g,酵母浸膏 3 g,蛋白胨0.5 g ,葡萄糖10 g,蒸馏水1000mL,pH自然,121℃湿热灭菌20min。
6.根据权利要求1所述的一种利用桦褐孔菌固体发酵农林废弃物生产酸性纤维素酶的工艺,其特征在于,所述斜面菌种培养基的配方为:麦芽浸膏40 g/100mL,蛋白胨4 g/
100mL,琼脂10 g/100mL,pH值为5.4-5.6。
7.根据权利要求6所述的一种利用桦褐孔菌固体发酵农林废弃物生产酸性纤维素酶的工艺,其特征在于,斜面菌种培养基上培养的参数为:温度27-28℃,培养200-250小时。
8.根据权利要求1所述的一种利用桦褐孔菌固体发酵农林废弃物生产酸性纤维素酶的工艺,其特征在于,所述酸性纤维素酶最适反应温度范围为40℃-60℃,最适反应pH范围为
3.0-4.0。
9.一种利用权利要求1的工艺生产的酸性纤维素酶的应用,其特征在于,所述酸性纤维素酶用于稻秆和麦秆的降解糖化。