1.一种蛹虫草活性组分的分离纯化方法,其特征在于,该方法采用如下步骤:
步骤1):将蛹虫草置于50-70℃条件下烘干至蛹虫草含水量在8%以下,超微粉碎5-
15min,获得超微蛹虫草粉;
步骤2):将步骤1)获得的超微蛹虫草粉加入到浓度为75-100%的乙醇溶液中,充分搅拌溶解,超声30-60min,静置1-12h,置于转速为8000-10000rpm离心机内离心获取上清液,重复1-2次,合并上清液;
步骤3):将步骤2)合并的上清液旋干获得固体,将固体置于烧杯中,缓慢加入蒸馏水溶解,并充分搅拌,获得浓度为0.9-1.1mg/ml溶液,再将溶液置于转速为8000-10000rpm离心机内离心,获得初步提取液;
步骤4):按质量份数,将400-600份偶联了Oligo(dT)的磁珠用400-600份水洗涤两次,加入100-300份初步提取液,重置磁珠,置于室温条件下反应5-10min,用磁性分离器进行磁性分离,在磁性分离器上用移液器将上清液弃去;再加入100-300份水,混匀磁珠,用磁性分离器进行磁性分离,在磁性分离器上用移液器移取上清液弃去,重复两次;继续加入50-200份水,混匀磁珠,置于65-100℃水浴加热5-30min,快速置于磁性分离架上,进行磁性分离,快速用移液器移取上清液弃去,获得虫草素溶液。
2.根据权利要求1所述的一种蛹虫草活性组分的分离纯化方法,其特征在于:步骤2)中所述微蛹虫草粉与浓度为70-100%乙醇质量比为1:5-20。
3.一种蛹虫草活性组分的分离纯化方法,其特征在于,该方法采用如下步骤:
步骤1):将蛹虫草置于60℃条件下烘干至蛹虫草含水量在8%以下,超微粉碎10min,获得超微蛹虫草粉;
步骤2):将步骤1)获得的超微蛹虫草粉加入到浓度为85%的乙醇溶液中,充分搅拌溶解,超声45min,静置8h,置于转速为9000rpm离心机内离心获取上清液,重复1次,合并上清液;
步骤3):将步骤2)合并的上清液旋干获得固体,将固体置于烧杯中,缓慢加入蒸馏水溶解,并充分搅拌,获得浓度为1.0mg/ml溶液,再将溶液置于转速为9000rpm离心机内离心,获得初步提取液;
步骤4):按质量份数,将500份偶联了Oligo(dT)的磁珠用500份水洗涤两次,加入200份初步提取液,重置磁珠,置于室温条件下反应8min,用磁性分离器进行磁性分离,在磁性分离器上用移液器将上清液弃去,加入200份水,混匀磁珠,用磁性分离器上进行磁性分离,在磁性分离器上用移液器移取上清弃去,重复两次,加入125份水,混匀磁珠,置于80℃水浴加热18min,快速置于磁性分离架上,进行磁性分离,快速用移液器移取上清液弃去,获得虫草素溶液。
4.根据权利要求3所述的一种蛹虫草活性组分的分离纯化方法,其特征在于:步骤2)中所述微蛹虫草粉与浓度为85%乙醇质量比为1:8。