1.一种发酵生产丁二酸的方法,其特征在于,以聚丙烯无纺布为载体固定化琥珀酸放线杆菌。
2.根据权利要求1所述的一种发酵生产丁二酸的方法,其特征在于,将琥珀酸放线杆菌固定于聚丙烯无纺布载体上,通过反复分批、反复补料分批的方式进行发酵。
3.根据权利要求1或2所述的一种发酵生产丁二酸的方法,其特征在于,所述聚丙烯无纺布的纤维直径在微米级别,聚丙烯无纺布克重为15—50g/m2、聚丙烯无纺布的纤维外径为2.5—10.8μm、微孔孔径约0.05—1.9μm、孔隙率约30—80%。
4.根据权利要求1或2所述的一种发酵生产丁二酸的方法,其特征在于,发酵液体积与无纺布表面积之比为0.5—2.5cm3/cm2。
5.根据权利要求1所述的一种发酵生产丁二酸的方法,其特征在于,是向种子培养基中接入琥珀酸放线杆菌,于35—40℃,在通CO2的厌氧条件下培养2—4h之后,放入卷成筒状的制备成聚丙烯无纺布并使其浸没在种子培养液中,继续吸附培养2—6h,从而将琥珀酸放线杆菌固定到聚丙烯无纺布上。
6.根据权利要求5所述的一种发酵生产丁二酸的方法,其特征在于,聚丙烯无纺布通过铁丝网进行定型。
7.根据权利要求1所述的一种发酵生产丁二酸的方法,其特征在于,将固定有琥珀酸放线杆菌的聚丙烯无纺布投入发酵培养基,维持厌氧环境,控制发酵温度35—40℃,控制pH5.8—7.2进行发酵,发酵培养基的葡萄糖浓度为15—20g/L。
8.根据权利要求2或7所述的一种发酵生产丁二酸的方法,其特征在于,反复分批发酵时,将固定有琥珀酸放线杆菌的聚丙烯无纺布投入发酵培养基,维持厌氧环境,控制发酵温度35—40℃,控制pH5.8—7.2进行发酵;发酵培养基的葡萄糖浓度为15—20g/L,发酵时间
4—30h,当发酵液中葡萄糖浓度低于3g/L时,放料并更换新鲜发酵培养基,重复进行下一批次发酵,反复发酵批次5—18次,总运行时间40—200h。
9.根据权利要求2或7所述的一种发酵生产丁二酸的方法,其特征在于,反复补料分批发酵时,将固定有琥珀酸放线杆菌的聚丙烯无纺布投入发酵培养基,维持厌氧环境,控制发酵温度35—40℃,控制pH5.8—7.2进行发酵,发酵培养基的葡萄糖浓度为15—20g/L,发酵时间8—15h,当发酵液中葡萄糖浓度低于10g/L时,一次性补加100g/L的葡萄糖,至反应器中葡萄糖浓度为20—50g/L,当发酵液中葡萄糖浓度低于5g/L时,重复补料过程,可补1次或者多次料,当发酵液中葡萄糖浓度再次低于5g/L时,放料并更换新鲜培养基;重复上述过程,进行下一批次发酵,总运行时间50—180h,期间保持无菌操作,并维持发酵罐中的厌氧环境。
10.根据权利要求1~9任一所述的一种发酵生产丁二酸的方法,其特征在于,发酵培养基组成为:葡萄糖15—20g/L,玉米浆10—30g/L,K2HPO41.5—3g/L,NaH2PO41.5—5g/L,谷氨酸钠0.05—2g/L,蛋氨酸0.05—0.5g/L,Na2S 1.5g/L,pH调至6.0—6.5。