1.一种烟草黑胫病菌发酵液致病活性组分的应用方法，其特征在于，步骤包括： (1)黑胫病菌菌丝在液体培养基中摇床振荡培养；收集无菌发酵液，离心，将上清液过 滤除菌，待用； (2)将步骤(1)得到的除菌后的黑胫病菌无菌发酵液通过微滤中空纤维素膜和超滤中空纤维素膜进行膜过滤分离，得到澄清透明的超滤液；将超滤液上柱进行大孔吸附树脂富集，最后用80-95％的乙醇将树脂上吸附的成分冲下，得到80-95％乙醇洗脱液，即黑胫病菌 发酵液致病活性组分； (3)以步骤(2)得到的80-95％乙醇洗脱液做为致病因子选择压对烟草品系的花药进行抗黑胫病筛选；

步骤(1)所述的液体培养基为PDA液体培养基；

步骤(1)中从培养后的第5d-7d收集无菌发酵液；

步骤(2)中采用的是5KDa微滤中空纤维素膜和3KDa超滤中空纤维素膜进行膜过滤分离。

2.根据权利要求1所述的应用方法，其特征在于， 以步骤(3)中筛选出的抗病花药加倍后的烟株为材料，通过叶片离体注射法，对筛选出 的烟株进行抗黑胫病鉴定。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于， 步骤(1)中的摇床培养条件：26-30℃、

180-250rpm。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于， 步骤(1)中4℃、6000-10000rpm离心10-

20min；将上清液经 0 .22um细菌过滤器过滤除菌，保存于4℃冰箱中待用。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于， 步骤(2)中采用的是D101型大孔吸附树脂。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于， 步骤(2)和步骤(3)中采用的乙醇浓度是

95％。

7.根据权利要求1-6任一项所述方法，其特征在于，以80-95％乙醇洗脱液作为致病因 子，且以2-3％的质量浓度作为选择压。