1.一种棕色蘑菇液态菌种的高密度生产方法,其特征在于:包括以下步骤:
1)菌种活化:
2)种子液的制备;
3)高密度发酵棕色蘑菇液体菌种:采用5L全自动发酵罐,装液量为3L,初始葡萄糖为
50g/L,接种量3%,25℃,通气量为发酵;在发酵过程,通过自动控制流加2mol/L的氢氧化钠将发酵过程的pH恒定为6.0;第一阶段0-24h搅拌控制在100转/分钟,结合自动控制通气量调整溶氧控制在50%,第二阶段24h之后停止搅拌,通过控制通气量来实现溶氧控制,溶氧控制在30%,总培养时间100-160小时。
2.根据权利要求1所述棕色蘑菇液态菌种的高密度生产方法,其特征在于,所述斜面培养基(g/L):葡萄糖20,蛋白胨2,磷酸二氢钾1,七水硫酸镁1.5,菜园土600,麦粒100,琼脂
25,121℃灭菌20min。
3.根据权利要求1所述棕色蘑菇液态菌种的高密度生产方法,其特征在于,所述种子培养基(g/L):葡萄糖20,蛋白胨2,磷酸二氢钾2,七水硫酸镁1,谷氨酰胺0.1,121℃灭菌
20min。
4.根据权利要求1所述棕色蘑菇液态菌种的高密度生产方法,其特征在于,所述发酵培养基(g/L):葡萄糖20,蛋白胨10,磷酸二氢钾2,七水硫酸镁1,121℃灭菌20min。
5.根据权利要求1-4任一所述棕色蘑菇液态菌种的高密度生产方法,其特征在于,包括以下步骤:菌种活化:将棕色蘑菇菌种转接入试管固体培养基斜面中,放入恒温培养箱25℃培养至满管;
种子液的制备:取3块0.5cm2新鲜斜面菌种接种于种子培养基(100mL/500mL三角瓶)中,
25℃,150r/min摇床培养5d;
高密度发酵棕色蘑菇液体菌种:采用5L全自动发酵罐,装液量为3L,初始葡萄糖为50g/L,接种量3%,25℃,通气量为发酵;在发酵过程,通过自动控制流加2mol/L的氢氧化钠将发酵过程的pH恒定为6.0;第一阶段0-24h搅拌控制在100转/分钟,结合自动控制通气量调整溶氧控制在50%,第二阶段24h之后停止搅拌,通过控制通气量来实现溶氧控制溶氧控制在
30%,总培养时间120小时。