1.一种基于铕配合物的可见光可激发的比率荧光温敏探针,其特征在于,所述探针的结构通式如下:
其中O^O配体的结构为:
a、b、c、d分别表示各物质的摩尔百分含量,且a+b+c+d=100%。
2.根据权利要求1所述的一种基于铕配合物的可见光可激发的比率荧光温敏探针,其特征在于,所述a<1%,b≥95%,c<5%,d<2%。
3.权利要求1所述的一种基于铕配合物的可见光可激发的比率荧光温敏探针的制备方法,其特征在于,包含以下步骤:
第1步、铕配合物的合成
(1)采用浓硫酸和浓硝酸二者的体积比为浓硫酸:浓硝酸=9:5在160~170℃条件下硝化1,10-邻菲啰啉得到5-硝基-1,10菲啰啉;
(2)采用水合肼和催化剂还原5-硝基-1,10菲啰啉,再与丙烯酰氯在乙腈或其他有机溶剂中酰胺化反应得到N^N配体;
(3)将O^O配体和EuCl3·6H2O置于甲醇或乙醇中,调节溶液pH至6~8,60℃条件下回流反应,再加入步骤(2)获得的N^N配体继续反应,即可合成铕配合物,铕配合物的结构通式为:
第2步、铱配合物的合成
(1)氮气保护条件下,将2,4-二氟苯硼酸和2-溴吡啶加入甲苯、乙醇、饱和K2CO3溶液的混合溶液中,80℃条件下避光密闭反应12h,其中甲苯、乙醇、饱和K2CO3溶液三者的体积比为
3:1:1,柱层析得主配体dfppy;
(2)氮气保护条件下,将IrCl3·3H2O和dfppy加入乙二醇乙醚、水的混合溶液中,110℃条件下密闭反应24h,其中乙二醇乙醚与水的体积比为3:1,得到[Ir(dfpp)2Cl2]2;
(3)氮气保护条件下,将[Ir(dfpp)2Cl2]2和1-羟基-2-吡啶羧酸加入乙二醇乙醚中,110℃条件下下密闭反应12h,柱层析得到[Ir(dfpp)2(hpa)];
(4)将[Ir(dfpp)2(hpa)]和3-溴丙烯置于N,N-二甲基甲酰胺或其他有机溶剂中,常温条件反应,反应完成后,经萃取、薄层层析得到[Ir(dfpp)2(apa)],铱配合物的结构式为:
第3步、聚合物的合成
在氮气保护条件下,将NIPAM、ATPMA、铱配合物、铕配合物在四氢呋喃或其他有机溶剂中由AIBN做引发剂,80℃条件下密闭反应,反应完成后,在乙醚或其他有机溶剂中沉降得到聚合物。
4.根据权利要求3所述的一种基于铕配合物的可见光可激发的比率荧光温敏探针的制备方法,其特征在于,当NIPAM、ATPMA、铱配合物、铕配合物投料摩尔百分数分别为94%,
4.8%,0.8%,0.4%,AIBN为总物质的量的2%时,所制得的探针性能较佳。
5.权利要求1所述的一种基于铕配合物的可见光可激发的比率荧光温敏探针在对水溶液、细胞及活体温度检测中的应用。
6.权利要求1所述的一种基于铕配合物的可见光可激发的比率荧光温敏探针在细胞成像、活体成像中的应用。
7.权利要求1所述的一种基于铕配合物的可见光可激发的比率荧光温敏探针在生物标记中的应用。
8.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述细胞及活体内温度检测采用比率法或比色法。