利索能及
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专利号: 2016100587467
申请人: 常州大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-05-14
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种毛细管电泳检测凝血酶与G‐四链体结合速率的方法,其特征在于:所述检测步骤如下:(1)选取带有荧光染料的DNA序列FAM-F29;

(2)将步骤(1)所述的FAM-F29在浓度均为5mM的Na+、K+盐溶液下反应24小时,得到浓度为2μM的含有G‐四链体结构的DNA荧光探针溶液;

(3)将粉末状的凝血酶溶解于Tris-HCl缓冲溶液中,稀释成不同浓度的凝血酶溶液;

(4)将步骤(2)所述的G-四链体结构的DNA荧光探针溶液与等体积的步骤(3)所述的凝血酶溶液在37℃恒温水浴下混合,得到凝血酶与G-四链体结构的DNA荧光探针复合物;其中,凝血酶与G‐四链体结构的DNA荧光探针的摩尔比为10:1;

(5)荧光毛细管电泳检测:将步骤(4)所述的复合物用荧光毛细管电泳检测,测定混合物通过检测通道峰面积与总的DNA通过检测通道的峰值面积之比,进行线性拟合,绘制峰面积比—时间的标准曲线,对照标准曲线计算凝血酶与G-四链体结合的速率。

2.如权利要求1所述的一种毛细管电泳检测凝血酶与G‐四链体结合速率的方法,其特征在于:步骤(1)所述的荧光染料为6-FAM或5-FAM。