1.一种实时监测G-四联体形成的单颗粒SPR探针的制备,包括合成颗粒(1)种子合成;(2)30nm金球的合成;(3)合成Au@Ag核壳纳米立方体,其特征在于,还包括制备纳米探针,具体为:将ITO玻璃浸泡在大小约50nmAu@Ag核壳纳米颗粒溶液中,通过物理吸附作用将Au@Ag核壳纳米立方体固定在ITO基底上;然后将200μL的Aptamer(5’-TTT TTT TTT TGG GTT AGG GTT AGG GTT AGG GTT TTT TTT TT-3-(CH2)6–SH)滴在ITO玻璃上,放在37℃的摇床中;分别固定不同时间,用超纯水冲洗掉表面多余的Aptamer;在不同浓度的钾离子溶液中检测探针,测得不同移动量的SPR光谱峰值,结果得到Aptamer的最佳修饰浓度0.5-10nM,最佳修饰时间1-4h。
2.如权利要求1所述的一种实时监测G-四联体形成的单颗粒SPR探针的应用,其特征在于,对钾离子的检测:
1)在制备的探针上分别滴加180μL不同浓度的钾离子溶液,通过采集SPR散射光谱数据,得到探针在不同浓度的钾离子作用下的SPR光谱的峰值与时间之间的关系曲线,以及-9 -2SPR光谱的峰移动量与钾离子浓度之间的关系图,钾离子溶液的浓度为10 -10 M是S型曲-7 -4线;其中在10 -10 M范围内具有良好的线性关系,最低检测限达到1nM;
2)数据分析:
用公式(1): 拟合该探针在不同浓度的钾离子的影响下的SPR
光谱的峰值与时间之间的关系曲线,得到25℃时G-四联体解离常数Kd;钾离子的浓度
0.1μM–0.1mM,分别对应的n值分别是0.89,1.27,1.37,1.49,1.87,2.01,G-四联体形成过程中可分为两种结合位点形态;用公式(2): (3): (4):ΔG=-RT ln Kep,分析SPR光谱的峰移动量与钾离子浓度之间的关系,得到不同浓度的钾离子与ΔG的线性关系图,以及用公式(5) 得到在形成稳定G-四联体结构的吉布斯自由能ΔG。