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专利号: 2015105408986
申请人: 北京大学人民医院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-01-15
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种检测急性T淋巴细胞白血病幼稚T细胞的试剂盒,该试剂盒的应用基于流式细胞仪,其特征在于,所述试剂盒中配置了单克隆抗体,所述单克隆抗体由分别针对TdT、cCD3、CD34、CD5、CD7、mCD3和CD45的7种组成,所述抗体分别带有荧光标记。

2.根据权利要求1所述的检测急性T淋巴细胞白血病幼稚T细胞的试剂盒,其特征在于,所述针对TdT、cCD3、CD34、CD5、CD7、mCD3和CD45的单克隆抗体依次带有下述荧光标记:FITC、PE、PerCP-Cy5.5、PE-Cy7、APC、APC-Cy7和Pacific Blue。

3.根据权利要求1所述的检测急性T淋巴细胞白血病幼稚T细胞的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中还包括红细胞溶解液和包含细胞固定液、破膜液的固定/破膜剂。

4.权利要求2所述的试剂盒在制备诊断急性T淋巴细胞白血病的产品中的应用,其特征在于,应用时对样本依次进行下述预处理步骤:① 将样本与CD34-PerCP-Cy5.5、CD5-PE-Cy7、CD7-APC、mCD3-APC-Cy7和CD45-Pacific Blue混匀后避光室温孵育10-20分钟,得混合液I;

② 向混合液I加入红细胞溶解液,混匀后避光,室温放置 5-10分钟,以1000-2000转/分、离心5-10分钟,弃上清,向沉淀中加入细胞固定液,混匀后避光孵育10-20min;

③ 加入 pH 为7.2 7.4的PBS缓冲液,混匀,1000-2000转/分、离心5-10分钟,弃上清,~向沉淀中加入破膜液,同时加入TdT-FITC和cCD3-PE,混匀,避光孵育5-10分钟;

④ 加入含血清0.5% 2%的PBS缓冲液,混匀,1000-2000转/分离心5-10分钟,弃上清,向~沉淀中加入的PBS缓冲液,混匀即得待测样本。

5.根据权利要求4所述的试剂盒在制备诊断急性T淋巴细胞白血病的产品中的应用,其特征在于,所述待测样本采用流式细胞仪进行测试,并借助分析软件按下述步骤分析数据:①先建立FSC/SSC密度图,将有核细胞区域设门标记为P1;

②对P1内细胞建立cCD3/SSC二维散点图,将cCD3+SSC小细胞设门标记为P2;

③对P2门内细胞建立CD45/cCD3二维散点图,将cCD3+CD45+/dim+细胞设门标记为P3;

④对P3门内细胞建立CD34/CD5、TdT/CD7和CD5/mCD3二维散点图,分别显示各群细胞的比例及CD34+和TdT+细胞在有核细胞中的比例,比较CD34、TdT、CD7、CD5和mCD3的荧光表达强度与正常T细胞的表达强度。