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专利号: 2015102174568
申请人: 江苏农牧科技职业学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-12-22
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种分子标记辅助选择提高黑羽番鸭脂肪沉积的育种方法,其特征在于,具体步骤包括:

1)提取黑羽番鸭基因组DNA;

2)参照野鸭的A-FABP基因序列设计引物,引物序列为:上游序列F:5′- TCTTCAGTCCATAGCACCCC -3′ ,如SEQ ID NO:1所示;

下游序列R: 5′- AAAAGGAACTCACCACCACC -3′,如SEQ ID NO:2所示;

3)以黑羽番鸭基因组DNA为模板进行PCR扩增;PCR扩增产物长度为171bp;

4)PCR扩增产物采用SSCP检测或直接测序,判定被检测个体属于以下哪种基因型:MM型、MN型、NN型,其中MM型的基因序列如SEQ ID NO:3所示;MN型的基因序列如SEQ ID NO:4所示;NN型的基因序列如SEQ ID NO:5所示;

如果某个体的基因型为MM型,则表示该个体脂肪沉积能力高,能作为种用,用于生产MM型后代;MN型也能作为种用,用于生产MM型;NN型不能产生MM型,直接淘汰。

2.根据权利要求1所述的分子标记辅助选择提高黑羽番鸭脂肪沉积的育种方法,其特征在于,所述PCR扩增条件:①反应液组成:

10×PCR Buffer,含Mg2+,2.5μL,dNTP,2.5mM,2μL,正向引物,10pM,1μL,

反向引物,10pM,1μL,

Taq聚合酶,5U/μL,0.2μL,dH2O,17.3μL,

DNA模板,1μL,

②扩增条件:

a. 95℃预变性5min;

b.95℃变性30s;

c.67℃退火30s;

d.72℃延伸30s;

e.72℃延伸10min;

f.4℃保存5min;其中步骤b-d需要经过35个循环周期。