1.一种具有FRET效应的还原敏感型聚合物纳米胶束的制备方法,其特征在于,包括:
制备mPEG-PCL;
将所述mPEG-PCL溶于四氢呋喃中,加入三乙胺并搅拌,再加入对硝基苯氯甲酸酯PNC,室温搅拌反应过夜,经纯化处理得到mPEG-PCL-PNC;
将胱胺二盐酸盐溶于二甲基亚砜和吡啶的混合液中,室温搅拌4小时,将所述mPEG-PCL-PNC溶于二甲基亚砜,混合所述胱胺二盐酸盐和mPEG-PCL-PNC的溶液,并于35~
50℃下连续搅拌反应2~3天,在重蒸水中透析3~4天,收集透析产物,冷冻真空干燥后得到mPEG-PCL-s-s-NH2;
将所述mPEG-PCL-s-s-NH2溶于二甲基甲酰胺中,加入FITC,所述mPEG-PCL-s-s-NH2与所述FITC的摩尔比为1:1~1:5,常温下搅拌,反应过夜,在二甲基甲酰胺中透析1~2天,转移至重蒸水中继续透析2~3天,真空冷冻干燥得到mPEG-PCL-s-s-FITC;
将所 述mPEG-PCL-s-s-NH2溶 于二 甲基 甲酰胺 中,加 入改 性Dabcyl,所 述mPEG-PCL-s-s-NH2与改性Dabcyl的摩尔比为1:1~1:5,常温下搅拌,反应过夜,在二甲基甲酰胺中透析1~2天,转移至重蒸水中继续透析2~3天,真空冷冻干燥得到mPEG-PCL-s-s-Dabcyl;及将所述mPEG-PCL-s-s-FITC和mPEG-PCL-s-s-Dabcyl分别溶于四氢呋喃中,然后按照所述mPEG-PCL-s-s-FITC与mPEG-PCL-s-s-Dabcy的质量比为1:1~1:3的比例混合得到混合溶液,在搅拌的过程中滴加重蒸水,将滴加了重蒸水的混合溶液转移到重蒸水中透析
2~3天,得到具有FRET效应的还原敏感型聚合物纳米胶束;
所述改性Dabcyl通过以下步骤制备:将Dabcyl溶于二甲基甲酰胺中,依次加入体积为所述二甲基甲酰胺的5~10倍量的二环己基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺,常温下搅拌反应过夜,离心后取上清,得到改性Dabcyl。
2.根据权利要求1所述的具有FRET效应的还原敏感型聚合物纳米胶束的制备方法,其特征在于,所述制备mPEG-PCL包括步骤:将 用氢化钙干燥,减压蒸馏;取甲基化的聚乙二醇,于80℃抽真空1小时;往所述甲基化的聚乙二醇中加入辛酸亚锡和干燥的 在氮气保护下140℃反应8小时后,加入氯仿溶解反应产物,再用正己烷沉淀,抽滤,真空干燥后得到mPEG-PCL。
3.根据权利要求1所述的具有FRET效应的还原敏感型聚合物纳米胶束的制备方法,其特征在于,所述mPEG-PCL与所述三乙胺的摩尔比为300:1~100:1。
4.根据权利要求1所述的具有FRET效应的还原敏感型聚合物纳米胶束的制备方法,其特征在于,所述mPEG-PCL与所述PNC的摩尔比为0.1:1~1:1。
5.根据权利要求1所述的具有FRET效应的还原敏感型聚合物纳米胶束的制备方法,其特征在于,所述mPEG-PCL-PNC与胱胺二盐酸盐的摩尔比为0.01:1~0.1:1。
6.根据权利要求1所述的具有FRET效应的还原敏感型聚合物纳米胶束的制备方法,其特征在于,所述纯化处理为将反应过夜的反应液经离心除去三乙醇胺盐酸盐,取上清液,加入体积为所述上清液的10~20倍的冰乙醚,抽滤,将固体物溶于四氢呋喃中,加入体积为所述四氢呋喃的10~20倍的冰乙醚,抽滤。
7.根据权利要求1所述的具有FRET效应的还原敏感型聚合物纳米胶束的制备方法,其特征在于,所述在搅拌的过程中滴加重蒸水的体积为所述混合溶液的体积的1/2~1。
8.根据权利要求1所述的具有FRET效应的还原敏感型聚合物纳米胶束的制备方法,其特征在于,所述将滴加了重蒸水的混合溶液转移到重蒸水中透析2~3天中采用透析袋进行透析,所述透析袋为截留分子量为1000~3500的透析袋。
9.一种具有FRET效应的还原敏感型聚合物纳米胶束,其特征在于,包括
mPEG-PCL-s-s-FITC和mPEG-PCL-s-s-Dabcyl,其中,具有FRET效应的供体FITC和受体Dabcyl通过共价交联接合到mPEG-PCL-s-s-NH2上,且所述mPEG-PCL-s-s-FITC和mPEG-PCL-s-s-Dabcyl的质量比为1:1~1:3。